描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母。

     發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標準。

     保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱	22RV1前列腺癌細胞說明書
規(guī)格	T25m2
貨號	BJ-X63210

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

細胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細胞懸浮生長。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

冷凍保存細胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
APOD 載脂蛋白D抗體 米氏硫胺素芽孢桿菌
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感離子通道1抗體 溶酪葡萄球菌
ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（C端） 調(diào)料葡萄球菌
AF10 髓系、混合系白血病易位基因10抗體 法氏檸檬酸桿菌
ADCY1 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 發(fā)酵乳桿菌
APC 腺瘤樣息肉抗體 抗輻射不動桿菌
AGPAT1 溶血磷脂?；D(zhuǎn)移酶抗體 巴氏葡萄球菌
ANKS3 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 海濱芽孢桿菌
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化間變型瘤激酶抗體 類芽孢桿菌
ACADVL ?；o酶A脫氫酶很長鏈抗體 短小芽孢桿菌
AMSH 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 肉葡萄球菌
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 粟褐芽孢桿菌
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體 沙門氏菌IV
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 熏衣草灰鏈霉菌
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 淺灰鏈霉菌杭州變種
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體 刺孢吸水鏈霉菌北京變種
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體 吸水鏈霉菌應(yīng)城變種
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體 諾爾斯氏鏈霉菌
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體 涇陽鏈霉菌
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 吸水鏈霉菌奧薩霉素亞種
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體 登佐鏈霉菌
ABI2 腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 抗輻射鏈霉菌
22RV1前列腺癌細胞說明書ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體 珊瑚鏈霉菌
ARMCX3 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 昆明鏈霉菌
ARMCX1 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 菲律賓鏈霉菌
ARMCX2 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體 沙鏈霉菌