菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產(chǎn)品名稱:Paracremonium
binnewijzendii 斜面
產(chǎn)品貨號:BJ-J13589
拉丁文: Paracremonium binnewijzendii
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級: 1
模式菌株: yes
培養(yǎng)基: PDA 培養(yǎng)基 :馬鈴薯提取液 1.0 L,葡萄糖 20.0 g,瓊脂 15.0 g,自然pH。
生長條件: 25-28℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
微生物培養(yǎng)方法:產(chǎn)品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
Paracremonium binnewijzendii 斜面種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
BrdU標記法組織冰凍切片細胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 2-甲氧基雌二醇 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,國產(chǎn)
MouseLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-甲氧雌二醇(標準品) 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標準品
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 ,英文名: PEDF ELISA Kit 鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明
Phenformin 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit
96T/48T 鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明(標準品)
Phenformin 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標準品用于含量測定
人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒 Human SCF/MGF ELISA kit 頭孢哌酮鈉
Cefoperazone 質(zhì)量規(guī)格:870μg-1015μg
/mg,USP,BR
RatInsulin,INSELISAKit大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 頭孢哌酮鈉(標準品) Cefoperazone 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
BrdU標記法組織石蠟切片細胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20 N-芐基甘氨酸 N-Benzylglycine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
MouseLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 扎那米韋
Zanamivir 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一水物
小鼠狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 ,英文名: T3 ELISA Kit 扎那米韋(標準品)
Zanamivir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
小鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 96T/48T 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷 Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
舒血管素;血管舒緩素;胰激肽釋放酶;激肽釋放酶(豬胰);激肽原酶;激肽釋放酶
Kallikrein from
porcine pancreas
其他Kininogenase;Kininogenin
產(chǎn)品規(guī)格:高,50u/mg
包裝:250毫克/1克
CAS號:
級別:High purity grade
活力:≥50u/mg
脂肪:≤0.1%
Kinase:≤0.8%
Trypsin-like
substrate:≤0.05%
Foreign activity:ATPase ≤5 nanomolar units/mg protein;Nucleoside diphosphokinase ≤20 nanomolar units/mg protein
活力定義:One light unit produces a biometer peak
height equivalent to 0.02 μCi of 14C in PPO/POPOP cocktail. Light
units measured in 50 μl assay mixture containing 5 pmol ATP and
7.5 nmol luciferin in Tris-glycine buffer, pH 7.6, at 25 °C
產(chǎn)品描述:Two contaminant, ATP-consuming activities
are assayed for in this product, ATPase and nucleoside diphosphokinase. These
impurities are found to be less than 5 nanomolar units/mg protein and less than
20 nanomolar units/mg protein, respectively.
Note: Prior to 1991, a unit of firefly luciferase activity was defined as that
amount which will produce 1.0 nanomole of pyrophosphate per minute at pH 7.7,
25 °C, using a system containing 0.6 mM ATP and
0.1 mM D-luciferin. The former nanomolar unit is equivalent to approximately
1.3 x 106 light units
性狀:粉末。EC:
用途:生化研究
S-腺苷蛋安醋隊本磺醋流醋鹽 cdqMqtioninq Disulfctq Tosylctq 97240-- 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)試劑盒 human RHOB ELISA Kit