產(chǎn)品名稱(chēng):續(xù)斷染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱(chēng):Radix dipsaci
規(guī)格:
50次
貨號(hào):BJ-01P3443
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:常溫
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。公司產(chǎn)品僅用于科研
組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2張
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照隨貨說(shuō)明書(shū)中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
1,4,8,12-四氮雜環(huán)十五烷(>97.0%(T)) 1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit人胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC)) 1,5,9-Triazacyclododecane 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 小鼠蛋酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)ELISA試劑盒 ,英文名: MAT1α ELISA Kit
1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC)) 1,4,7-Triazacyclononane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit
96T/48T
1,4,7-基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉) 1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane
(stabilized with NaHCO3) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)試劑盒 Rat Endothelin-conveing
enzyme 1,ECE1 ELISA kit
1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC)) 1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱(chēng)RatcAMPELISAKit大鼠環(huán)-0酸腺苷(cAMP)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
1,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC)) 1,4,7-Trithiacyclononane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升
1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC)) Tetraethyl
1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) ELISAKitPPI人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶規(guī)格:48T/96T
1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N)) Tri-tert-butyl
1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N) 小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒
1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T)) Tri-tert-butyl
1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) Rat urokinase
type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒
4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))
4-tert-Butylcalix[8]arene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISAKit 人抗人類(lèi)缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
組織IKKα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic
acid ethyl ester 3543-72-4 中文名: 分子式:C14H17N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
組織II型L-3羥?;?span lang="EN-US">-CoA脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 1-Methyl-aminomethyl naphthalene 中文名: 分子式:C12H13N 度:98.0%
組織IGF-1R激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 1-Monopalmitin 542-44-9 中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次 1-Naphthol 中文名: 分子式:C10H8O 度:96.0%
組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次 1-Testosterone
100
100
100
1000164-43-1
Fmoc-Ser(tBu)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH
25g Semen ziziphi spinosae酸棗仁探針?lè)?span lang="EN-US">PCR鑒定試劑盒
1000164-43-1 Fmoc-Ser(tBu)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH 5g Herba cynomorii鎖陽(yáng)探針?lè)?span lang="EN-US">PCR鑒定試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.續(xù)斷染料法PCR鑒定試劑盒調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。