注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
英文名稱	詳見說明
貨號(hào)	BJ-R014783

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit                 Fumaric acid  110-17-8  中文名：  分子式：C4H4O4 

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A   英文名稱：   Mouse Pulmonary surfacta associated protein type A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SP-A  Benzyl L-(+)-mandelate  62173-99-3  中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3 

小鼠非肌性肌球蛋白重鏈9   英文名稱：   nonMyosin Heavy Chain 9   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   nonMYH9hc  Edaravone  89-25-8  中文名：依達(dá)拉奉  分子式：C10H10N2O 

小鼠防御素A2   英文名稱：   Mouse Defensins A2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DA2  Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠泛素蛋白elisa試劑盒   小鼠泛素蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠泛素蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠泛素蛋白試劑盒、小鼠泛素蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Cyproterone acetate  中文名：醋酸環(huán)丙氯地孕酮  分子式：C24H29ClO4

醋酸地塞米松  Dexamethasone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 人谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit

醋酸地塞米松（標(biāo)準(zhǔn)品）  Dexamethasone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲氧芐啶  Trimethoprim  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) ANNEXINV-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒10/20

甲氧芐啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  Trimethoprim  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

西維來司鈉  Sivelestat    質(zhì)量規(guī)格：含量大于98.5% 小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 ，英文名： PLGF ELISA Kit

奈韋拉平  Nevirapine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP30,BR 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T

奈韋拉平（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nevirapine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 Human GSH-Px ELISA Kit

磺胺甲惡唑  Sulfamethoxazole(SMZ)  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

磺胺甲惡唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sulfamethoxazole(SMZ)  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 APATHY封片液10毫升

硫酸頭孢匹羅  Cefpirome Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>760μg/MG,BR  MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羽葉白頭樹Garuga pinnata Reynorin 槲皮素-3-D-木糖甙 549-32-6 C20H18O11 ≥95%

蟾毒靈BufclinHPLC≥98%，20mg/支

(R型)人參皂苷Rg3 20(R)Ginsenoside Rg3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對(duì)照藥材地耳草121468-200401TLC法鑒別

Sweroside獐芽菜苷度：98%