注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱: 豬圓環(huán)病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟
英文名稱: 詳見說明
產品貨號: BJ-R014811
產品規(guī)格: 50T
產品分類: PCR熒光定量檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
豬圓環(huán)病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
小鼠促黃體** 英文名稱: leinizing
hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
LH Labetalol 32780-64-6 中文名:鹽酸拉貝洛爾 分子式:C19H25ClN2O3 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠促黃體elisa試劑盒 小鼠促黃體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠促黃體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠促黃體試劑盒、小鼠促黃體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Clemastine fumarate
14976-57-9 中文名:富馬酸氯馬斯汀 分子式:C25H30ClNO5 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠促黃體(LH)ELISA試劑盒 Cleroindicin C 中文名: 分子式:C8H12O3
小鼠促黃體(LH)ELISAKit Convallagenin B 中文名:鈴蘭皂苷元B 分子式:C27H44O6 度:97.5%
小鼠促紅細胞**素 英文名稱: erythropoietin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPO Floribundone 1 118555-84-3 中文名: 分子式:C32H22O10 度:99.0% 關鍵詞: 光葉決明; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
鹽酸米諾環(huán)素(標準品) Minocycline 質量規(guī)格:>98%,BR 牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase MB Isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
鹽酸米托蒽醌(進分) Mitoxantrone HCl 質量規(guī)格:進分sigma
M6545 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質2(BMP-2)規(guī)格:96T/48T
鹽酸米托蒽醌
Mitoxantrone HCl 質量規(guī)格:>98%,USP,可用于細胞培養(yǎng) 動物細胞/組織細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10
鹽酸米托蒽醌(標準品)
Mitoxantrone HCl 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
咪唑立賓
Mizoribine 質量規(guī)格:>98%,細胞培養(yǎng)級 小鼠死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK3 ELISA Kit
莫吉司坦
Moguisteine 質量規(guī)格:>98%,BR 豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T
莫吉司坦(標準品) Moguisteine 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)試劑盒 Bovine
Creatine Kinase BB Isoenzymes,CK-BB ELISA Kit
糠酸莫米松
Mometasone furoate 質量規(guī)格:>98%,USP31 英文名稱HumanOsteoprotegerinELISAKIT人骨保護素(OPG)規(guī)格:96T/48T
糠酸莫米松(標準品) Mometasone furoate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 動物細胞/組織細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10
納他霉素,匹馬霉素,那他霉素,游霉素 Natamycin,Pimaricin 質量規(guī)格:>90%,BR Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胎球蛋白 -A(Fetuin-A) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝 Varenicline
tartrate 375815-87-5 中文名:酒石酸伐侖克林 分子式:C17H19N3O6
羧酸酯酶(CarE)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4,5,6,7-Tetrahydrothieno
[3,2,c]pyridine 28783-41-7 中文名: 分子式:C7H10ClNS 度:98.0% 關鍵詞:
損傷分子1 英文名稱: Human Kidney
Injury Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: KIM-1
4,4'-Dimethoxytrityl chloride
40615-36-9 中文名:4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷 分子式:C21H19ClO2 度:98.0% 關鍵詞:
髓過氧化物酶(MPO)檢測 Myeloperoxidase (MPO) detection Rasagiline mesylate 161735-79-1 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S 度:98.0% 關鍵詞:
髓過氧化物酶(MPO)測試盒 Myeloperoxidase (MPO) test kit Ranitidine 中文名:鹽酸雷尼替丁 分子式:C13H23ClN4O3S