注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
雞馬立克病毒(MDV)核酸試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014824 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
雞馬立克病毒(MDV)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒
Furazolidone 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit Deflazacort 14484-47-0 中文名:地夫可特 分子式:C25H31NO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠半胱天冬蛋白酶-3 英文名稱: cysteine-aspaic
acid protease-3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-3 Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 9
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒
Furazolidone 67-45-8 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISAKit Deoxylapachol 3568-90-9 中文名: 分子式:C15H14O2 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
鹽酸氟西?。?biāo)準(zhǔn)品)
Fluoxetine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 DuckIerleukin-4,IL-4ELISA試劑盒鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
馬來(lái)酸氟伏沙明
Fluvoxamine maleate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2007 藻類菌脂質(zhì)綠色熒光染色試劑盒20
馬來(lái)酸氟伏沙明(標(biāo)準(zhǔn)品)
Fluvoxamine maleate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
福美斯坦
Formestane 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠瘦素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 ,英文名: Leptin receptor ELISA Kit
福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Formestane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 牛分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA檢測(cè)試劑盒BovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit
96T/48T
福辛普利鈉
Fosinopril 質(zhì)量規(guī)格:度≥99.0%(HPLC) 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒 Human 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit
呋塞米(速尿)
Furosemide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱MouseIerleukin-15,IL-15ELISAKIT小鼠白介素-15(IL-15)規(guī)格:96T/48T
呋塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)
Furosemide 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
吉非羅齊
Gemfibrozil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISA試劑盒大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吉非羅齊(標(biāo)準(zhǔn)品) Gemfibrozil 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒 ,英文名: LEPR ELISA Kit
生長(zhǎng) 英文名稱: growth
hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
HGH Przewaquinone A 76843-23-7 中文名:紫丹參甲素 分子式:C19H18O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗腫瘤; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
生長(zhǎng)分化因子-3 英文名稱: growth
differeiation factor 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GDF-3
3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone
899822-97-0 中文名: 分子式:C17H25NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
生長(zhǎng)分化因子 -3(GDF-3) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Nitrendipine 39562-70-4 中文名:尼群地平 分子式:C18H20N2O6
生長(zhǎng)分化因子 -15(GDF-15) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝
3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 中文名: 分子式:C17H25NO3
生化檢測(cè)試劑盒 3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol 116539-55-0 中文名: 分子式:C8H13NOS 度:98.0%