產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品名稱： 牛流行熱病毒(BEFV)核酸試劑盒說明書

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號： BJ-R014922

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

牛流行熱病毒(BEFV)核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

營養(yǎng)肉湯500毫升  2-Acetamidothiazole  2719-23-5  中文名：2-乙酰氨基噻唑  分子式：C5H6N2OS  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

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印度墨負性染色試劑盒50次  2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

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聚乙二醇8000  PEG 8000  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T

氯化鋰(分子生物學(xué)級)  Lithium chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人分泌成分(SC)試劑盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit

硫酸亞鐵銨六水  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

紅四氮唑  TTC,TTZ,Tetrazolium Red  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Chu’sN6完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

磺胺甲氧噠嗪  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

磺胺甲氧噠嗪(標(biāo)準品)  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA試劑盒 ，英文名： CO ELISA Kit

TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽  TCEP;   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T

硫代硫酸鈉五水(AR)   thiosulfate, pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR 人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit

化鈉(AR)   iodide  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR RatLaminin,LNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

可溶性淀粉  Starch soluble  質(zhì)量規(guī)格：BR Chymoypsin

綿羊球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

綿羊促卵泡**   英文名稱：   Follicle Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit                 Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit     Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%