注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研

參數規(guī)格：

產品名稱	糞腸球菌（EF）核酸試劑盒實驗步驟
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R014995

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

產品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

糞腸球菌（EF）核酸試劑盒實驗步驟3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。

兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  13649-88-2  中文名：  分子式：C23H29NO4  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11α-Hydroxycanrenone  中文名：  分子式：C22H28O4  度：98.0%

兔子皮質酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  564-33-0  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子皮質醇elisa試劑盒   兔子皮質醇試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子皮質醇試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子皮質醇試劑盒、兔子皮質醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2  度：98.0%

兔子皮質醇elisa試劑盒   兔子皮質醇試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子皮質醇試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子皮質醇試劑盒、兔子皮質醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%

1-癸烷磺酸鈉[離子對色譜級]  IPC-ALKS-10  質量規(guī)格：離子對色譜用試劑 人谷胱甘肽硫轉移酶pi基因(GSTpi)ELISA檢測試劑盒HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 96T/48T

1-十一烷基磺酸鈉[離子對色譜級]  IPC-ALKS-11  質量規(guī)格：離子對色譜用試劑 大鼠胰島素原(PI)試劑盒 Rat Proinsulin,PI ELISA Kit

1-十二烷基磺酸鈉[離子對色譜級]  IPC-ALKS-12  質量規(guī)格：離子對色譜用試劑 英文名稱HumanAGRPELISAKit人Agoi相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-十三烷磺酸鈉[離子對色譜級]  IPC-ALKS-13  質量規(guī)格：離子對色譜用試劑 糞便DNA分離+高質化試劑盒50

十二烷基硫酸鈉[離子對色譜級]  IPC-SDS  質量規(guī)格：離子對色譜用試劑 ELISAKiAG-1人重組激活基因1規(guī)格：48T/96T

十五氟辛酸(約5mmol)[離子對色譜級]  IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)  質量規(guī)格：用于液相色譜-質譜的離子對試劑 小鼠母系胚胎亮酸拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試劑盒 ，英文名： MELK ELISA Kit

十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級]  IPC-PFFA-8 HG  質量規(guī)格：用于液相色譜-質譜的離子對試劑 人花生四烯酸(AA)ELISA檢測試劑盒HumanArachidonicAcid,AAELISAKit 96T/48T

9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對色譜級]  IPA-DAS  質量規(guī)格：用于氨類的熒光離子對試劑 大鼠胰島素樣因子3(INSL3)試劑盒 Rat Insulin-Like 3,INSL3 ELISA Kit

敵草隆(標準品)  Diuron  質量規(guī)格：分析標準品,99.5% 英文名稱Human8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT人8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格：96T/48T

茜素紅  Alizarin red  質量規(guī)格：AR 糞便DNA分離試劑盒50

Wright's-GiemsaStainingSolion  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO 

Umbelliferone   25g                 4-Aminobenzophenone  中文名：4-氨基二苯甲酮  分子式：C13H11NO 

Tween80   250ml  4-Aminobutyric acid  1956/12/2  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2 

TMB   1g                 4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS 

TMA   500g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2