Matrigel 基底膜基質(zhì),無(wú)酚紅,Matrigel基質(zhì)會(huì)有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
推薦包被與成膠方法:
注意:為了保證Matrigel基質(zhì)膜的成膠性能與穩(wěn)定性,稀釋濃度不應(yīng)低于1:3,可用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋?zhuān)琈atrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長(zhǎng)面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,即可使用。
厚膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴,將培養(yǎng)的細(xì)胞與Matrigel基質(zhì)混合,用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為150-200μL/cm2生長(zhǎng)面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,可成膠??梢约尤爰?xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),也可使細(xì)胞直接生長(zhǎng)在膠表面。
薄層包被方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.根據(jù)使用需要,采用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel基質(zhì)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要確定*佳包被濃度。
3.將稀釋的Matrigel基質(zhì)包被于所需的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋整個(gè)器皿的生長(zhǎng)表面。室溫下孵育1小時(shí)。
4.去除未結(jié)合的Matrigel,用無(wú)血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。
Tyrosine decarboxylase 酪氨酸脫羧酶 25克 BR,2500~7000u/mg,豬血
Tyramine hydrochloride 對(duì)羥基苯乙胺鹽酸鹽 5克 BR,98%
Tween 85 吐混85 500毫克 BR
Tween 80 吐混80 100毫克 BR,99%
Tween 65 吐混65 1克 BS
Tween 60 吐混60 500毫克 FMP
Tween 40 吐混40 1克 高純,98%
Tween 20 吐混20 100毫克 高純,98%
TV 四唑紫 100毫克 超純,99%