細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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RSC96；大鼠雪旺細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86242 |
細(xì)胞名稱 大鼠雪旺細(xì)胞；RSC96
形態(tài)特性 神經(jīng)元
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 RSC96細(xì)胞株是原代培養(yǎng)的大鼠雪旺細(xì)胞經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后自發(fā)轉(zhuǎn)化而成的[PubMed: 9766530]。 2002年十二月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體。 其后代通過(guò)BM 細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周，用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)。 結(jié)果都呈陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
7-Benzyloxyindole 中文名：7-芐氧基吲哚 分子式：C15H13NO 大鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷 英文名稱： Cyclic
guanosine monophosphate 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： cGMP
7-Amino-4-methylcoumarin 中文名：7-氨基-4-甲基 分子式：C10H9NO2 乙酰膽堿酯酶（T－CHE）檢測(cè) Acetylcholine ansferase (ChAT) detection
7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic
acid 中文名： 分子式：C8H10N2O3S 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）檢測(cè) Detection of
the ache of the choline
7-Acetoxy-4-methylcoumarin 中文名：7-乙酰氧基-4-甲基 分子式：C12H10O4 丁酰膽堿酯酶檢測(cè) Glucose -6-
phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection
7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one 中文名： 分子式：C12H13NO3 葡萄糖-6-0酸脫氫酶（G－6－PD）檢測(cè) BN
N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detectionL鼠李糖 HPLC≥98% 100mg 小鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ，英文名： PECAM1 ELISA Kit
L絲氨酸 HPLC≥98% 200mg 牛白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit
96T/48T
L蘇氨酸 HPLC≥98% 200mg 人ADP-核糖基化因子4(ARF4)試劑盒 Human ARF4 ELISA kit
L天冬氨酸 HPLC≥99% 200mg 英文名稱MouseIL-1sRⅠELISAkit小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L天冬酰胺 HPLC≥98% 200mg 冰凍切片組織BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
L纈氨酸 HPLC≥98% 200mg RatClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L異亮氨酸 HPLC≥98% 200mg 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61
ELISA Kit
L組氨酸 HPLC≥98% 200mg 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 96T/48T
L組氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 Human TIMP-1 ELISA Kit
Milataxel HPLC≥98% 20mg Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit大鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T硝酸奧昔康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）
Oxiconazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒 ，英文名： SS ELISA Kit
普瑞巴林（標(biāo)準(zhǔn)品）
Pregabalin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠生長(zhǎng)因子(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousegrowthhormone,GHELISAKIT
96T/48T
(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質(zhì)）（標(biāo)準(zhǔn)品） [(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
RSC96；大鼠雪旺細(xì)胞5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。