細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 新生牛眼Tenon＇s囊成纖維細(xì)胞；NBTF
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系細(xì)胞。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
NBTF；新生牛眼Tenon＇s囊成纖維細(xì)胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號(hào) |
BJ-01X86398 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Methyl 4'-bromomethyl
biphenyl-2-carboxylate 中文名： 分子式：C15H13BrO2 度：98.0% 小鼠C反應(yīng)蛋白 英文名稱： C-reactive
protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫：
CRP
Methyl
4'-methylbiphenyl-2-carboxylate 中文名： 分子式：C15H14O2 度：98.0% 小鼠CXC趨化因子受體3 英文名稱： CXC chemokine
receptor 3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： CXCR3
4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic
acid 中文名： 分子式：C12H14N2O2 度：98.0% 小鼠CXC趨化因子配體16 英文名稱： CXC chemokine
ligand 16 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： CXCL16
Androstenediol 中文名：雄烯二醇 分子式：C19H30O2 度：98.0% 小鼠CXCL1/KC 英文名稱： CXC chemokine
ligand 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫：
CXCL1/KC
Testosterone
benzoate 中文名：17-安息香酸雄烯醇酮 分子式：C26H32O3 度：98.0% 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISAKit1-(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)
1-(Trifluoroacetyl)imidazole 質(zhì)量規(guī)格：用于GC衍生化,≥98.5% 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒ratEndothelin1,ET-1ELISAKit
96T/48T
2,3-二丙酰胺(98%)
2,3-Dibromopropionamide 質(zhì)量規(guī)格：0.98 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)試劑盒 Human
ETFB ELISA Kit
滑石粉(800目) Talc 質(zhì)量規(guī)格：800目 RatneuropeptideY,NP-YELISAKit大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
滑石粉(藥用級(jí),325目) Talc 質(zhì)量規(guī)格：藥用級(jí),325目 EDTA三血液抗凝液100毫升
硼砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(硼砂PH(25℃)：9.18) pH standard－Borax 質(zhì)量規(guī)格：硼砂PH(25℃)：9.18
Mousepyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISA試劑盒小鼠同酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-苯氧芐醇(98%)
3-Phenoxybenzyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格：0.98 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒
果膠(半乳糖醛酸(干基計(jì))≥74.0 %)
Pectin 質(zhì)量規(guī)格：半乳糖醛酸(干基計(jì))≥74.0 % Rat
connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
三丁酯(AR,99%)
Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格：AR,99% Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
三丁酯(CP)
Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格：CP HumanAdenovirusAigen,ADV-AgELISA試劑盒人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 直接細(xì)胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒100夾竹桃它羅苷 HPLC≥98% 5mg PorcineHistamine,HISELISA試劑盒豬組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲基赤芝萜酮 HPLC≥98% 5mg
PorcineHyaluronicacid,HAELISA試劑盒豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲基異石榴皮堿 HPLC≥98% 5mg
PorcineHydrocoisone,HYDELISA試劑盒豬(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲氧呋豆素 HPLC≥98% 5mg Porc
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
NBTF；新生牛眼Tenon＇s囊成纖維細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。