產品屬性:
產品名稱
檢測下限
規(guī)格
貨號
萊克多巴胺快速檢測試劑盒
5.0μg/kg
50樣/盒
BJ-019556
【樣本前處理步驟】
樣本處理前須知 產品僅用于科研處理任何樣本時,都必須注意:
(1) 實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭(2)實驗前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時對實驗器具進 行清潔,避免污染干擾實驗結果。
(a)組織樣品處理方法:
1、 稱取5±0.05g組織樣品于50ml離心管中,先加入3ml已稀釋好的樣品提取液震蕩2min;再加入10ml乙腈,充分震蕩5min,
2、 加入2g中性氧化鋁;震蕩2min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;
3、 取6ml上清液于干凈離心管中,加入5ml二氯甲烷震蕩3min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;
4、 取下層清澈液體于玻璃管中,加入20ul氧化劑混勻,在56℃條件下氮氣或空氣流吹至完全干燥;
5、 加入1ml復溶液,充分溶解干燥殘留物。
6、 取100ul 上清液與100ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s,
7、 取50ul進行分析。
樣本稀釋倍數: 1倍
(b)水樣品處理方法:
1、取50ul 上清液與450ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s,
2、取50ul進行分析。
樣本稀釋倍數:10倍
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
萊克多巴胺快速檢測試劑盒1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。