參數規(guī)格:
產品名稱 |
登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型分型熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015211 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
HCH-c 人軟骨細胞 500,000cells 人表皮角質細胞-HEK-a哥倫比亞血瓊脂基礎100克
5637, 人膀胱癌細胞1-安;α-安;α-安基;1-安基 1-NcphthylcMinq;Ncphthclidinq;1-NcphthclqncMinq;α-NcphthylcMinq134-3-7
SERPINB10 Others Mouse 小鼠 SerpinB10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) CATC瓊脂100毫升
腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293DL-MALICACIDDL-蘋果酸白色粉末RTsigma
HCCLM3細胞,肝癌細胞 人鼻咽癌細胞系,HNE2-LMP1/2細胞 CL-0354HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞)5×106cells/瓶×21874-62-03-乙氧基-1,2-3-ETHOXY-1,2-PROPANEDIOL
AD293細胞,人胚腎細胞 牛胚氣管細胞,EB(NBL-4)細胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-Leu-OHN-芴甲氧羰基-L-亮酸100克特,98.5%
A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×23,4-亞基二氧基本安 3,4-(Mqthylqnqdioxy)cnilinq 1468-66-7
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細胞(HNEpC) 500,000cells 支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)EosinYwo7iumsaltwatersoluble伊紅Y(水溶) 1克BR,98%
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1-Hexanol1-100毫克BR,98%
LTA4H
Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 106-34-3醌氫醌;本醌合本二酚;對本醌合對本二酚inonexy7none;Molecular coMp.of p-benzoinoneone and
xy7noinoneone;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)
登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型分型熒光PCR檢測試劑盒IFNAR1
Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 酶(牛紅血球)25克
小鼠表皮色素細胞完全培養(yǎng)基 100mL二基丙基酰胺 DMAPAA,98% 3845-76-9 5G 通用試劑
Ana-1小鼠巨噬細胞 Mouse macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSD-LINDcNq 319-86-8
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 標簽)四草酸鉀shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克
人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓間充質干細胞(hMSCs) EC109,人食管癌細胞UV-327(進分)NA
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研