參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
甲型流感 / 乙型流感 / 丙型流感病毒熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015227 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡萄糖-6-1酸脫氫酶,硫酸銨懸浮液質(zhì)量規(guī)格:酶活>200 NADP units/mg,BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase
CM-H022人前列腺成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml,BC)質(zhì)量規(guī)格:>12,000U/ml,BCMalate dehydrogenase
BBOX1 Others Human 人 BBOX1 / Gamma-BBH 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 草甘膦標準溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%N-(Phosphonomethyl)glycine solution
支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)辛(分析標準品,99%)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%Phoxim
恒河猴腎細胞;RM-1 人胰腺癌細胞,HPAC細胞 SGC-7901(胃腺癌細胞)除草標準溶液(10μg/ml,u=5%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%Nitrofen solution
人微血管內(nèi)皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口β-Nicotinamide adenine dinucleotide
3'-phosphate salt hydrate
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenine
家兔腎細胞;RABK3硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Thionicotinamide adenine dinucleotide
HIC細胞,人小腸癌細胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T](R)-9-[2-(二乙基1?;籽趸?/span>)丙基]腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×27-二去甲基米諾環(huán)素二鹽酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口7-Didemethyl Minocycline Di
甲型流感 / 乙型流感 / 丙型流感病毒熒光PCR檢測試劑盒HuT 78(人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2蘋果酸脫氫酶測試盒(測組織)100支/包
6T-CEM (人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H075人腎足突細胞完全培養(yǎng)基100mL 人結(jié)膜成纖維細胞RNAHConF miRNA5 μg四氮坐醋 1H-Tqtrczolq-1-ccqtic ccid 173-17-
CM-R063大鼠腎小球內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL血清兔抗人IgG,F(ab)21公斤RT
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) TG-SDS-BUFFER,10XREADY-PACKTG-SDS緩沖液, 干粉蛋白組學級白色粉末RTsigma
大鼠小腦星形膠質(zhì)細胞RA-c4-溴-1-硝基本1-Bromo-4-nitnobenzene
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研