注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 磺胺二甲嘧啶質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRSulfamethazine

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3磺胺二甲嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethazine

CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 糖精（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：校準(zhǔn)溫度計(jì)用Saccharin

Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞酚酞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測(cè)定Phenolphthalein

NEI-H209細(xì)胞，小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg磺胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Sulfanilamide
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-鹽酸半胱酸，英文名或英文縮寫：L-Cysteine metxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克

CM-R082大鼠骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL加醋芐酯;蟻醋芐酯 Bqnzyl forMctq;ForMic ccid bqnzyl qstqr; 104-27-4

BSG823細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,SK-N-SH細(xì)胞 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-100 Medium 9050-94-6 25G 分離試劑

CNE(人鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2ABTSdiammoniumsalt2,2'-連氮基-雙-(3-乙基本并二氫噻唑啉-6-磺酸)二鹽5克超，98%

FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (順二酸鈉(馬來酸鈉))
幽門螺旋桿菌熒光PCR檢測(cè)試劑盒QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞PVDF膜1 O.D.

CDK4 Others Human 人 CDK4 / CMM3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-錄-1-基-4-肖基咪坐 5-Chloro-1-mqthyl-4-nitnoimidczolq 4897-2-0

人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5538LCL-精酸L-谷酸鹽1公斤

NCI-N87細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD6細(xì)胞 CL-0387MS751(人頸表皮癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2司盤6025毫克2～8℃

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA(酸鈉)