參數規(guī)格:
產品名稱 |
豬腦心肌炎病毒熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015278 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 諾氟沙星鹽酸鹽質量規(guī)格:含量大于98.5%Norfloxacin HCl
胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液) 1mL諾氟沙星鹽酸鹽(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Norfloxacin HCl
U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構建穩(wěn)定株)人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅清+2μg/ml puromycin丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽質量規(guī)格:>98%,BRAla-Gln
IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標簽)L-精氨酸甲酯二鹽酸質量規(guī)格:>99%,BRH-Arg-OMe·2HCl
人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬D-丙氨酰胺鹽酸鹽質量規(guī)格:>98%,BRD-Alaninamide
KM小鼠未分化神經膠質瘤瘤株;B222',3'-雙脫氧腺苷(ddA)質量規(guī)格:>98%,BRDideoxyadenosine
ZR-75-30細胞,癌細胞 人食管癌細胞,TE-11細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1木糖醇質量規(guī)格:>98.5%,ARXylitol
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6木糖醇(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Xylitol
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2',3'-二脫氧胸苷(ddT)質量規(guī)格:>98%,進分2',3'-Dideoxythymidine
人內皮細胞總RNAHDLEC NA7,8-二氫-L-生物蝶呤質量規(guī)格:美國進口7,8-Dihydro-L-biopterin
豬腦心肌炎病毒熒光PCR檢測試劑盒IL17A
Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白砷試劑,英文名或英文縮寫:AgDDTC,級別:高,98%,規(guī)格:25克
人少突膠質前體細胞(HOPC-os)(懸浮生長) 人間充質干細胞-臍帶 U251人膠質瘤細胞二本同 2-Phqnylccqtophqnonq 421-40-1
CM-H105人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mLD-本鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:D-pxenylalanine metxyl ester xy7nochloride,級別:BR,98%,規(guī)格:25克
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) Nickelicoxide色氧化鎳1克AR,99%
人支氣管平滑肌細胞HBSMCIndoxyl-GlucuronideCHASalt 10mg原裝/100mg原裝 INALCO1758-1377
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研