熒光定量PCR試劑盒技術(shù)原理
本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測的即用型PCR試劑盒,可以對靶片段進(jìn)行實(shí)時(shí)定量 PCR分析(quantitative PCR、qPCR)。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有實(shí)時(shí)定量PCR所需 要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)和HRM分析,具有 廣泛的用途。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。