一、反應(yīng)物自身的因素

抗體：不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).

 抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.

二、反應(yīng)環(huán)境條件

酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行.蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點.抗原抗體反應(yīng)一般在pH6～9進(jìn)行,有補體參與的反應(yīng)pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng).

 溫度：在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機(jī)會增多,使反應(yīng)加速.一般為15℃～40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其獨特的適反應(yīng)溫度要求.此外,適當(dāng)振蕩也可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng).

 電解質(zhì)：抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng).為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.