己糖激酶檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
日期：2025-04-04 22:07
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摘要：
己糖激酶（Hexokinase）廣泛存在于動(dòng)植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑中控制葡萄糖代謝速率的**個(gè)關(guān)鍵酶，可催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖，在機(jī)體代謝過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。
己糖激酶可催化葡萄糖和ATP**葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和ADP，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）可催化葡萄糖-6-磷酸脫氫**6-磷酸葡萄糖酸（6-PGA），同時(shí)使NADP+還原成NADPH，NADPH在340 nm處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值變化即可表征己糖激酶的活性。
己糖激酶檢測(cè)原理
測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿（光徑=1 cm）/96孔UV板、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器/多道移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。
1.粗酶液的制備（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量和比例）
①**或細(xì)胞：離心收集**或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照**或細(xì)胞數(shù)量（10個(gè)）：提取液體積（mL）為（500-1000）：1的比例（建議500萬(wàn)**或細(xì)胞加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功率20%或200 W，超聲3 s，間隔10 s，重復(fù)30次），4℃ 8000 g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)。
②組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為1：（5-10）的比例（建議稱取0.1 g組織，加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)。
③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接檢測(cè)或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)。
己糖激酶可催化葡萄糖和ATP**葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和ADP，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）可催化葡萄糖-6-磷酸脫氫**6-磷酸葡萄糖酸（6-PGA），同時(shí)使NADP+還原成NADPH，NADPH在340 nm處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值變化即可表征己糖激酶的活性。
己糖激酶檢測(cè)原理
測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿（光徑=1 cm）/96孔UV板、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器/多道移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。
1.粗酶液的制備（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量和比例）
①**或細(xì)胞：離心收集**或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照**或細(xì)胞數(shù)量（10個(gè)）：提取液體積（mL）為（500-1000）：1的比例（建議500萬(wàn)**或細(xì)胞加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功率20%或200 W，超聲3 s，間隔10 s，重復(fù)30次），4℃ 8000 g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)。
②組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為1：（5-10）的比例（建議稱取0.1 g組織，加入1 mL提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)。
③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接檢測(cè)或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)。