描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母。

     發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

     保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱	22RV1前列腺癌細(xì)胞說明書
規(guī)格	T25m2
貨號(hào)	BJ-X63210

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
APOD 載脂蛋白D抗體 米氏硫胺素芽孢桿菌
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感離子通道1抗體 溶酪葡萄球菌
ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（C端） 調(diào)料葡萄球菌
AF10 髓系、混合系白血病易位基因10抗體 法氏檸檬酸桿菌
ADCY1 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 發(fā)酵乳桿菌
APC 腺瘤樣息肉抗體 抗輻射不動(dòng)桿菌
AGPAT1 溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體 巴氏葡萄球菌
ANKS3 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 海濱芽孢桿菌
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化間變型瘤激酶抗體 類芽孢桿菌
ACADVL ?；o酶A脫氫酶很長(zhǎng)鏈抗體 短小芽孢桿菌
AMSH 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 肉葡萄球菌
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體 粟褐芽孢桿菌
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體 沙門氏菌IV
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 熏衣草灰鏈霉菌
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 淺灰鏈霉菌杭州變種
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體 刺孢吸水鏈霉菌北京變種
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體 吸水鏈霉菌應(yīng)城變種
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體 諾爾斯氏鏈霉菌
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體 涇陽(yáng)鏈霉菌
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 吸水鏈霉菌奧薩霉素亞種
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體 登佐鏈霉菌
ABI2 腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 抗輻射鏈霉菌
22RV1前列腺癌細(xì)胞說明書ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體 珊瑚鏈霉菌
ARMCX3 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 昆明鏈霉菌
ARMCX1 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 菲律賓鏈霉菌
ARMCX2 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體 沙鏈霉菌