小鼠滑膜細(xì)胞提取物【Mouse Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives】

小鼠滑膜細(xì)胞提取物是從小鼠滑膜細(xì)胞提取的，小鼠滑膜細(xì)胞從正常小鼠滑膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

服務(wù)描述：

公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨：

客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

保存和應(yīng)用：

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞 其它疊氮-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Azido-erythro-sphingosine

CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-赤-二氫鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口DL-erythro-Dihydrosphingosine

滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞裂解物HVTLD-赤-二氫-D-鞘氨醇-1-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口D-erythro-Dihydro-D-sphingosine-1-phosphate

IFNA8 Others Human  Ierferon alpha-B / IFNA8 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 籠形D-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Caged D-erythro-Sphingosine-1-phosphate

BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1L-(-)-葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-(-)-Glucose
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sfTIBA2,3,5-三代本酸5克CP，99%

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G 通用試劑

類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN務(wù)二晴punum>98% Glutcronitnilq 244-13-8

F2-2細(xì)胞，5-8轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠色素瘤細(xì)胞,B16BL6細(xì)胞 CM-H047肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLTOTALPROTEINCELLLYSISBUFFER總蛋白細(xì)胞裂解緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)透明無(wú)色液體COLDsigma

NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21343-88-0硅酸載體 silicate
SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢癌腺癌細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T6細(xì)胞 ES-2(卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)三亞乙基硫代1酰胺Triethylenethiophosphoramide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03普拉克索堿Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

CD4 Others Mouse 小鼠 CD4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 普拉克索堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1染料木素/金雀異黃酮Genistein質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品）Genistein質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng)：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精（建議配置75%的酒精的水是過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.小鼠滑膜細(xì)胞提取物用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。