冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

大鼠心肌組織提取物【Rat Heart: Normal Heart Derivatives】

心肌分布在心和鄰近心的大血管根部。心肌主要由心肌纖維構成，期間有結締組織、心血管和神經(jīng)。心肌收縮有自主節(jié)律性，緩慢而持久。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠心肌組織中高質量的總RNA，PCR準備的條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

產(chǎn)品描述：公司科技提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司科技提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司科技售后服務標準。

保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研。

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精（建議配置75%的酒精的水是過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

IFNAR2 Others Human  IFNAR2 / IFNABR 細胞裂解液 (陽性對照) 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亞苯(>95.0%(GC))質量規(guī)格：>95.0%(GC)2,3,6,7,10,11-Hexamethoxytriphenylene

細胞;Hela2,3,6,7,10,11-六羥基三亞苯水合物(>95.0%(HPLC))質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexahydroxytriphenylene Hydrate

APOL1 Others Human  APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亞苯(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene

CL-0421RAG(小鼠腎腺癌細胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亞苯(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene

羊膜上皮細胞 雙位點HC-KIT受體細胞株，DMF7細胞 BLO-11(小鼠骨骼成纖維細胞)1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) TERRIFICBROTH,POWDER**肉湯, 粉末生物技術級100GRT

HL-60, 早幼粒白血病細胞鉬醋銨;四水合鉬醋銨;七鉬醋銨;仲鉬醋銨 cMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq;Molybdic ccid cMMoniuM sclt tqtrchydrctq;cMMoniuM hqptcMolybctq;HqxccMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq 1024-82-

IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 細胞裂解液 (陽性對照) H-Glu-PNAL-谷?；?span>-4-硝基本胺100毫克BR，98%

EB病毒轉化的B細胞(傣族);KM9405胞嘧啶25克

GP2-293Luc細胞，胚腎上皮包裝細胞 綠猴恒河猴腎細胞,LLC-MK2細胞 CL-0348Hce-8693(盲腸腺癌細胞(未分化))5×106cells/瓶×2(豬膽鹽)
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL雙甘氨二肽Gly-Gly質量規(guī)格：>99%,BR

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅**清重組胰島素Human recombinant Insulin質量規(guī)格：效價測定

IGFBP7 Protein Human 重組 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標簽)胰島素Human Insulin質量規(guī)格：測定用

HAN(羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM硝酸舍他康唑Sertaconazole nitrate質量規(guī)格：>98%,BR

腎小球內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)醋酸依降鈣素 Elcatonin Acetate質量規(guī)格：BR
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3大鼠心肌組織提取物.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。