H1細(xì)胞專用因子Y27632（相關(guān)3）

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

保存溫度（℃）：/-20℃

運輸溫度（℃）：/-20℃(干冰)

服務(wù)描述：

公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨：

客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

保存和應(yīng)用：

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
辛伐他汀羥基酸銨鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Simvastatin Hydroxy Acid, Ammonium Salt  Rat neuophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒  石蠟切片組織線粒體DNA萃取試劑盒10

N-氧基索拉菲尼質(zhì)量規(guī)格：美國進口Sorafenib N-Oxide  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  ELISAKitNGF人的神經(jīng)生長因子規(guī)格：48T/96T

甲基索拉菲尼-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口Sorafenib-methyl-d3  HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒人球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit

硫康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進口Sulconazole  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒20  人叉頭框蛋白02(FoxO2)ELISA檢測試劑盒HumanforkheadboxO2,FOXO2ELISAKit 96T/48T
雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長度)質(zhì)量規(guī)格：Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)  RatActivinA,ACV-AELISA試劑盒大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)試劑盒 Rat N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit

交叉縫式碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)  小鼠Sideroflexin小鼠1蛋白(SFXN1)ELISA試劑盒 ，英文名： SFXN1 ELISA Kit  CLIAKitforSophorajaponicaagglinin,SJAELISAKit槐凝集素規(guī)格：48T/96T

復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)(允許溫度上限:620℃)質(zhì)量規(guī)格：Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C)  人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測試劑盒Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T  乳品類食物DNA分離試劑盒10

復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length)  大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白細(xì)胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)試劑盒 Rat Arachidonate 12-lipoxygenase,leukocyte-type,Alox12l/Alox12/Alox15 ELISA kit  ELISAKitCTAPⅢ人結(jié)締組織活化肽Ⅲ規(guī)格：48T/96T
小鼠腦成纖維細(xì)胞提取物【Mouse Brain: Normal Brain Fibroblasts Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg

小鼠脈絡(luò)膜組織提取物【Choroid: Normal Mouse Choroidal Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 10μg/ 200μg

小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞提取物【Mouse Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg
注意事項：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精（建議配置75%的酒精的水是過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5H1細(xì)胞專用因子Y27632（相關(guān)3）.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。