菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純**菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些**菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產(chǎn)品名稱:波茨坦短芽孢桿菌
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-J13532
拉丁文: Brevibacillus borstelensis
提供形式: 凍干物
**等級(jí): 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
微生物培養(yǎng)方法:產(chǎn)品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
波茨坦短芽孢桿菌種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
英文名稱HumanBonemorphogeneticproteieceptor1AELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)受體1A(BMPR1A)規(guī)格:96T/48T 胸腺肽alpha 1
Thymosin alpha 1 Acetate 質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分
動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒10/50 替加氟
Tegafur 質(zhì)量規(guī)格:>98%
RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試劑盒大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替加氟(標(biāo)準(zhǔn)品)
Tegafur 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
小鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit 阿昔莫司,阿西莫司 Acipimox 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseNeuroophin3,-3ELISAkit
96T/48T 阿昔莫司,阿西莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)
Acipimox 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 human GAD-Ab-IgM ELISA Kit 阿達(dá)帕林 Adapalene 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKit大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿達(dá)帕林(標(biāo)準(zhǔn)品) Adapalene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
AP標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 阿德福韋 Adefovir 質(zhì)量規(guī)格:>98%
MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Adefovir 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit 阿爾法骨化醇 alfacalcidol 質(zhì)量規(guī)格:>99%
復(fù)合酶
Compound
proteinase
其他Protamex
產(chǎn)品規(guī)格:BR,200U/mg
包裝:5克/25克/100克
級(jí)別:BR
活力:≥120units/mg
作用溫度:40~50℃
作用PH值:5.0~8.0
參考用量添加酶:0.2~0.8g/kg
性狀:淺褐色粉末或顆粒。由枯草桿菌(Bsubtilis)深層液體發(fā)酵產(chǎn)生,經(jīng)濃縮提取精制復(fù)合而成。是為水解蛋白質(zhì)而研制的桿菌蛋白酶復(fù)合體。本品主酶是堿性蛋白酶,酶活力根據(jù)主酶活力定義。酶處理溫度40~50℃,處理50分鐘,用蒸餾水浸泡13小時(shí),其中沉淀物是載體。
保存:2~8℃
142-84-7二正胺Dipropylamine rabbitSolubleprotein-100B,S-100BELISA試劑盒兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T