菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產品名稱:巴西曲霉
產品貨號:BJ-J13571
拉丁文: Aspergillus brasiliensis
提供形式: 凍干粉
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。
生長條件: 25,好氧
生長特性: @BNCC在CPDA斜面上生長5-7天,產黑色孢子。
微生物培養(yǎng)方法:產品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
巴西曲霉種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,質量保證,為大中型科研提供嚴格質量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
冰凍切片組織CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 替拉替尼
17-AAG 質量規(guī)格:HSP90 抑制劑,BR,進分
RatCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替拉替尼 17-AAG 質量規(guī)格:HSP90 抑制劑,BR,進分
小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRP-Ghrelin ELISA Kit 鹽酸特拉唑嗪 Terazosin HCl 質量規(guī)格:>98.5%,二水合物
小鼠紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA檢測試劑盒MouseErythropoietieceptor,EPORELISAKit
96T/48T ,素
Testosterone 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒 Human
cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit (標準品)
Testosterone 質量規(guī)格:HPLC≥98%標準品
RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸丁卡因
Tetracaine HCl 質量規(guī)格:>98.5%,BR
BJ5183-AD-1鈣轉感受態(tài)100微升 鹽酸丁卡因(標準品)
Tetracaine HCl 質量規(guī)格:HPLC法含量測定
MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯甲唑啉鹽酸鹽/鹽酸妥拉唑林 Tolazoline
HCl 質量規(guī)格:>98%,進口原裝
小鼠生長釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRP ELISA Kit 托特羅定 Tolterodine Tartrate 質量規(guī)格:>98.5%,M受體(毒蕈堿型乙酰膽堿受體)拮抗劑
小鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA檢測試劑盒Mouseacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1ELISAKit 96T/48T 托特羅定(標準品) Tolterodine Tartrate 質量規(guī)格:含量測定
SP
其他Sucrose Phosphorylase;Sucrose:orthophosphate α-D-glucosytransferase
產品規(guī)格:BR,100u/mg
包裝:100U/500U
CAS號:9074-06-0
級別:BR
活力:≥100units/mg protein
性狀:粉末。From L.Mesenteroides
用途:生化研究
DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級白色粉末RTsigma HumanCTX-2ELISAKit 人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝