產(chǎn)品名稱：續(xù)斷染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱：Radix dipsaci
規(guī)格: 50次
貨號：BJ-01P3443

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：常溫

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。公司產(chǎn)品僅用于科研

組成

1 30倍濃縮洗滌液      20ml×1瓶

2 酶標(biāo)試劑                 6ml×1瓶

3 酶標(biāo)包被板              12孔×8條

4 樣品稀釋液              6ml×1瓶

5 顯色劑A液               6ml×1瓶  

6 顯色劑B液               6ml×1/瓶  

7 終止液                     6ml×1瓶

8 標(biāo)準(zhǔn)品                     0.5ml×1瓶

9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2張

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

1,4,8,12-四氮雜環(huán)十五烷(>97.0%(T))  1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit人胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))  1,5,9-Triazacyclododecane  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC) 小鼠蛋酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)ELISA試劑盒 ，英文名： MAT1α ELISA Kit

1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))  1,4,7-Triazacyclononane  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA檢測試劑盒HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit 96T/48T

1,4,7-基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)  1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)試劑盒 Rat Endothelin-conveing enzyme 1,ECE1 ELISA kit

1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))  1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱RatcAMPELISAKit大鼠環(huán)-0酸腺苷(cAMP)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

1,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))  1,4,7-Trithiacyclononane  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升

1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))  Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) ELISAKitPPI人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶規(guī)格：48T/96T

1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))  Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate  質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N) 小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒

1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))  Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T) Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒

4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))  4-tert-Butylcalix[8]arene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISAKit 人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-72-4  中文名：  分子式：C14H17N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

組織II型L-3羥?；?span lang="EN-US">-CoA脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒20次  1-Methyl-aminomethyl naphthalene  中文名：  分子式：C12H13N  度：98.0%

組織IGF-1R激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次  1-Monopalmitin  542-44-9  中文名：1-棕櫚酸單甘油酯  分子式：C19H38O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性檢測試劑盒20次  1-Naphthol  中文名：  分子式：C10H8O  度：96.0%

組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次  1-Testosterone  1965/6/5  中文名：1-  分子式：C19H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
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實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．續(xù)斷染料法PCR鑒定試劑盒調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。