注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒原理

英文名稱:  Afipia spp.PCR
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R013240

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒原理.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

Sulfamonomethoxine   38006-08-5  中文名：磺胺間甲氧嘧啶鈉  分子式：C11H11N4NaO3S  度：98.0%      小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit              

Sulfamonomethoxine  1220-83-3  中文名：磺胺間甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S  度：98.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)PCR檢測(cè)試劑盒  

Sulfamethoxazole  723-46-6  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)PCR檢測(cè)試劑盒  

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)PCR檢測(cè)試劑盒  

Sulfaguanidine  57-67-0  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)PCR檢測(cè)試劑盒

Ophthalmic Acid  R 396  (Tyr5,D-Trp6?8?9,Lys-NH210)-Neurokinin A (4-10)  Neuromedin U-25(porcine)  Magainin I

BIBP3226  Neuropeptide Y (1-24) amide (human, rat)  Acetyl-(Leu28?31)-Neuropeptide Y (24- 36),Acetyl-(Leu28?3  (D-Trp11)-Neurotensin  Magainin II

Neuropeptide Y (human,rat)  (Cys2)-Neuropeptide Y (1-4)-8-aminooctanoyl-(D-Cys27)- Neuro  Tyr-Lys-Gly-(Cyclo(Glu26- Lys29),Pro34)-Neuropeptide Y (25-3  (D-Tyr11)-Neurotensin  DABCYL-Glu-Arg-Nle-Phe-Leu-Ser-Phe-Pro-EDANS

Biotinyl-Neuropeptide Y(human, rat)  Neuropeptide Y (2-36) (human, rat)  (D-Tyr27?36,D-Thr32)-Neuropeptide Y (27-36)  Neurotensin (1-6)  H(-EENV)6-OH

Neuropeptide Y (freeacid) (human, rat)  Neuropeptide Y (2-36) (porcine)  ((Cys31,Nva34)-Neuropeptide Y (27-36))2  Neurotensin (1-8)  VTCG

人Apelin蛋白(APLN)PCR檢測(cè)試劑盒 別稱:APEL, XNPEP2 Human APLN(Apelin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組APLN濃度。