注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產品名稱： 類天花病毒PCR檢測試劑盒說明書

英文名稱:  Alastrim VirusPCR
產品貨號： BJ-R013246

產品規(guī)格： 50T

產品分類： PCR檢測試劑盒

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品特點：本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

產品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

類天花病毒PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。8．PCR擴增產物；

9．PCR反應體系與反應條件。

Taxilluside A  1661914-46-0  中文名：  分子式：C18H24O10    Humancytovillin/ezrin,CVLPCR檢測試劑盒人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)PCR檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

n-Butyl β-D-fructofuranoside  80971-60-4  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6    組織INSULI激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Palmitone  502-73-8  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O    Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)PCR檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  54232-58-5  中文名：  分子式：C18H30O3    兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Acetylatractylodinol  61582-39-6  中文名：乙酰蒼術素醇  分子式：C15H12O3    Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠**素受體Tie2(ANG-R-Tie2)PCR檢測試劑盒

Acetyl-(D-Arg10,Cys11,D-Phe14,Cys17)-β -MSH (10-17) amide  Myelin Basic Protein (4-14)  Abz-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dap(Dnp)-Ala-Arg-NH2  Mca-PLGL-Dap(Dnp)-AR-NH2  LHRH (free acid)

Acetyl-(Cys11,D-2-Nal14,Cys18)-β -MSH (11-22) amide  (Des-Gly77,Des-His78)- Myelin Basic Protein(68-84) (bovine)  Ac-Pro-Leu-Gly-OH  Mca-PLGLEEA-Dap(Dnp)-NH2  LHRH (1-5) (free acid)

(Deamino-Cys11,D-2- Nal14,Cys18)-β -MSH (11-22) amide, JKC-3  (Des-Gly77,Des-His78)-Myelin Basic Protein (68-84) (guinea p  CTT  Mca-PKPLAL-Dap(Dnp)-AR-NH2  LHRH (1-6) (free acid)

β -MSH (monkey), β -MSH(5-22) (human)  Myelin Basic Protein(83-99) (bovine)  DABCYL-γ -Abu-PQGL-Glu(EDANS)-AK-NH2  Peptide 74  LHRH (1-6) amide

β -MSH (porcine), β -Lipotropin (41-58) (porcine)  Myelin Basic Protein (87-99) (human, bovine, rat)  Dnp-RPLALWRS-OH  Metorphamide  (D-Leu6)-LHRH (1-8)(free acid)

人C1q腫瘤壞死因子相關蛋白3(C1QTNF3)PCR檢測試劑盒 別稱:C1QTNF3, C1ATNF3, CORCS, CORS, CORS-26, CORS26, CTRP3, C1q and tumor necrosis factor related protein 3, C1q and TNF related 3, Collagenous repeat-containing sequence 26 kDa protein, Secretory protein CORS26 Human C1QTNF3(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組C1QTNF3濃度