注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書

英文名稱:  Aspergillus nidulansPCR
產(chǎn)品貨號： BJ-R013274

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

構(gòu)巢曲霉PCR檢測試劑盒說明書2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

Tiotropium bromide  中文名：噻托溴銨  分子式：C19H22NO4S2    載脂蛋白A-I（ApoA-I）測定試劑盒（比濁法）

Tinidazole  中文名：替硝唑  分子式：C8H13N3O4S    銅（Cu）測定試劑盒（絡(luò)合比色法）

Timosaponin B-II  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19    α-巖藻糖苷酶（AFU）測定試劑盒（速率法）                 

Timosaponin AIII  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13    載脂蛋白D   英文名稱：   Human Apolipoprotein D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ApoD

Tigogenin  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3    載脂蛋白M   英文名稱：   Human Apolipoprotein M   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ApoM

(Lys7)-Dermorphin  Defensin HNP-3 (human),Human Neutrophil Peptide-3, HNP-3  GGH  Ac-Tle-Tle-Asn(Me)2-Ala- AMC  Cortistatin-14 (mouse,rat),(Des- Ala1,Pro2,Ser12)- Somatosta

(Phe4)-Dermorphin (1-4)amide  Defensin HNP-2 (human)， Human Neutrophil Peptide-2, HNP-2  DAHK  Abz-Tle-Tle-Asn(Me)2-ASSRL-3-nitro-Tyr-Arg-OH  Astressin

(D-Arg2,Lys4)-Dermorphin(1-4) amide  Defensin HNP-1 (human)， Human Neutrophil Peptide-1, HNP-1  Ac-HHGH  (Tyr0)-C-Type Natriuretic Peptide (32-53) (human, porcine, r  α -Helical CRF (12-41)

(D-Arg2,Sar4)-Dermorphin (1-4)  (Gly106)-Cytochrome C(92-107) (Manduca sexta)  (Tyr0,Gln1)-Pol-Rfamide  C-Type Natriuretic Peptide (32-53) (human, porcine, rat)  (D-Phe12,Nle21?38,α -Me-Leu37)-CRF (12-41)(human, rat)

Dermorphin  Cytochrome C (88-104)(domestic pigeon)  Pol-Rfamide  C-Type Natriuretic Peptide (1-53) (human),CNP-53 (human)  Boc-MLF

人S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)PCR檢測試劑盒 別稱:S100-B, NEF, S100Beta Human S100B(S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組S100B濃度