注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 人外周血AFP mRNA表達(dá)水平PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號： BJ-R014667

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR熒光定量檢測試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

人外周血AFP mRNA表達(dá)水平PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)Elisa試劑盒     Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  429659-01-8  中文名：  分子式：C18H20N4O5  度：98.0%   

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ElisaKit     Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  中文名：  分子式：C14H13NO4S  度：98.0%

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa試劑盒              Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  429659-01-8  中文名：  分子式：C18H20N4O5 

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ElisaKit     Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  中文名：  分子式：C14H13NO4S 

小鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒     Makisterone A 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C31H50O7

去甲黃腐醇 HPLC≥95% 20mg 小鼠細(xì)胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP7A1 ELISA Kit

異丹參酮II HPLC≥95% 20mg 兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測試劑盒Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T

紫丹參素C HPLC≥95% 20mg 牛血小板活化因子(PAF)試劑盒 Bovine platelet activating factor,PAF ELISA Kit

維采寧 HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumansP-selectinELISAKit人可溶性sP-選擇素(sP-selectin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

氯化飛燕草素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg 等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍祛色溶液500毫升

氯化飛燕草素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISA試劑盒大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化飛燕草素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg 小鼠細(xì)胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP3A4 ELISA Kit

氯化矢車菊素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T

氯化矮牽牛素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg 牛血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Bovine Thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit

氯化矮牽牛素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumansE-selectin[CD-62E]ELISAKit人可溶性E-選擇素(sE-selectin[CD-62E])規(guī)格：96T/48T

薏苡仁油 Coix seed oil 0.2ml

維生速D3VitaminD320mg

Agnuside 牡荊油 11027-63-7

青陽參甙元A青陽參苷元AQingyangshengenin A

烏藥環(huán)戊甲醚;metxyllind 3984-73-4 20mg 訂購|咨詢