注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	肉毒桿菌B型（CB-B）核酸試劑盒實驗步驟
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R014991

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

肉毒桿菌B型（CB-B）核酸試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISAKit     9-Dehydroandrostenedione  中文名：9-去氫雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  中文名：17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮  分子式：C21H28O3  度：95.0%

兔子神經(jīng)生長因子elisa試劑盒   兔子神經(jīng)生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子神經(jīng)生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子神經(jīng)生長因子試劑盒、兔子神經(jīng)生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Benzoyl-L-histidine  中文名：苯甲?；?span lang="EN-US">-L-組氨酸  分子式：C13H13N3O3 

兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISAKit                 9-Dehydroandrostenedione  中文名：9-去氫雄烯二酮  分子式：C19H24O2 

兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17-Acetyloxy-6-chloro-1α-chloromethylpregna-4,6-diene-3,20-dione  17183-98-1  中文名：醋酸環(huán)丙氯地孕酮  分子式：C24H30Cl2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

重水,氧化氘(50G)  Deuterium Oxide  質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISA試劑盒人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

重水,氧化氘(100G)  Deuterium Oxide  質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% 格莫瑞(Gomori'sMethenamineSilver;GMS)銀染試劑盒50

氘代硫酸(0.55 ml x 10)  Sulfuric Acid-D2  質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%, acidity 90% IN D2O  Mouseai-redcellaibodyELISAKit小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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氘代鹽酸(5g )  Deuterium Chloride  質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 20% IN D2O  大鼠胰淀素(Amylin)試劑盒 Rat Amylin ELISA Kit

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γ干擾素   英文名稱：   Rabbit γ Ierferon   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IFN-γ  Albendazole  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S 

β-整合素   英文名稱：   β-Iegrin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   β-Iegrin  Wallicoside  88797-59-5  中文名：斷節(jié)參苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  關(guān)鍵詞：