注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 廣州管圓線蟲(AC)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  詳見說明
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R015007

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： 熒光-PCR法

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

廣州管圓線蟲(AC)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒   兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     7-Oxo-β-sitosterol  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2 

兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒     8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  666816-98-4  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2 

兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  547-91-1  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S 

兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,2,3,6-Tetra-O-galloyl-β-D-glucose  79886-50-3  中文名：1,2,3,6-四-O-沒食子酰-β-D-葡萄糖  分子式：C34H28O22  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  8-Azaguanine  134-58-7  中文名：8-氮雜鳥嘌呤  分子式：C4H4N6O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

反油酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Elaidic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC) 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit 96T/48T

十七碳酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Heptadecanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit

十七碳酸（98%）  Heptadecanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98 英文名稱Human14-3-3proteinELISAKit人14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格：96T/48T

隱色孔雀石綠（標(biāo)準(zhǔn)品）  Leucomalachite Green  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 糞便DNA分離試劑盒50

二十酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methyl Arachidate  質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(GC) ELISAKitTNFsR-Ⅱ人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ規(guī)格：48T/96T

蓖麻油酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methyl ricinoleate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(GC) 小鼠球蛋白G2α(IgG2α)ELISA試劑盒 ，英文名： IgG2α ELISA Kit

山崳酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methyl behenate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-OJ-aibody，OJ/IleRSELISAKit 96T/48T

二十四烷酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methyl tetracosanoate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠胰島素受體底物2(IRS2)試劑盒 Rat insulin receptor subsate 2,IRS2 ELISA Kit

芥酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）   Methyl cis-13-docosenoate  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC) 英文名稱Human1,25-dihydroxyvitaminD3ELISAKit人1，25-二羥基維生素D3(1,25(OH)2D3)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

十九酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nonadecanoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC) 糞便DNA分離試劑盒50

rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-Amino-3-methylbenzoic acid  中文名：2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式：C8H9NO2  度：98.0%

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-6-chloropurine  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-6-chlorobenzothiazole  95-24-9  中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  1971-49-9  中文名：2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3  度：93.0%  關(guān)鍵詞： 

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2