注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 人星狀病毒(HastV)核酸試劑盒圖片
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R015013
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: 熒光-PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
人星狀病毒(HastV)核酸試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αelisa試劑盒 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 甘蔗; 菠蘿; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone 152305-23-2 中文名:(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮 分子式:C10H12N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 7-Oxo-β-sitosterol 2034-74-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗高; 松屬; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit 7α-Hydroxystigmasterol 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 度:%
兔子膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 度:99.0%
鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,,基體:1%HNO3) Lead standard 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,,基體:1%HNO3 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)ELISA檢測試劑盒HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 96T/48T
镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in
10%HCl) Lutetium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl 大鼠胰島素受體底物1(IRS-1)試劑盒 Rat
insulin receptor subsate-1,IRS-1 ELISA Kit
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 英文名稱HumanIactPTHELISAKit全段甲狀腺素(IactPTH)規(guī)格:96T/48T
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:
1%HCl) Molybdenum standard 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體: 1%HCl 風(fēng)信子完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品) Nickel
standard 質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTNF-β人腫瘤壞死因子β規(guī)格:48T/96T
鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Niobium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 小鼠酶(CAT)ELISA試劑盒 ,英文名: CAT ELISA Kit
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3) Nickel
Standard 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T
鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Potassium standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水 人表皮生長因子受體2(sp185/Her2)試劑盒 Human
HER2 ELISA Kit
鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:1%HCl) Potassium Solution 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:1%HCl Raturokinase,UKELISAKit大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Praseodymium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml NFKAPPABP50蛋白共沉淀分析試劑盒5
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 兔子促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol
2215-96-5 中文名: 分子式:C11H14O5 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 8
QSPlasmidMaxiKit 10T
Tranexamic acid 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2
PlasmidMidiKit 100T trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO
PlasmidMaxiKit 10T trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO