注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	馬源性成分(Horse)核酸試劑盒原理
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R015040

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

馬源性成分(Horse)核酸試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒     6-Amino-1-methyluracil  2434-53-9  中文名：  分子式：C5H7N3O2 

兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit     6-Amino-1,3-dimethyluracil  中文名：  分子式：C6H9N3O2  度：98.0%

兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒     6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  中文名：  分子式：C5H6N4O3  度：98.0%

兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit     6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  6972-78-7  中文名：  分子式：C5H6N4O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒              6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  中文名：  分子式：C5H6N4O3

活性炭(凈水、氣體化,棒,φ4.0mm)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化,棒,φ4.0mm Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

活性炭(脫色,200目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：脫色,200目 ERBETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

活性炭(細(xì)胞培養(yǎng)級)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：細(xì)胞培養(yǎng)級 MouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

活性炭(植物細(xì)胞培養(yǎng)級)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：植物細(xì)胞培養(yǎng)級 小鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA試劑盒 ，英文名： p-NF-κB ELISA Kit

10X分子篩(干燥劑用)     質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA檢測試劑盒ratProstaglandinE1,PG-E1Elisakit 96T/48T

13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱)  Molecular sieves Type 13X  質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱 人電壓門控通道(VGKC)試劑盒 Human voltage-gated potassium channel,VGKC ELISA Kit

13X分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱)  Molecular sieves Type 13X  質(zhì)量規(guī)格：80-100目,氣相、液相色譜柱 RatNeuroophin4,-4ELISAKit大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13X分子篩(40-60目,氣相、液相色譜柱)  Molecular sieves Type 13X  質(zhì)量規(guī)格：40-60目,氣相、液相色譜柱 EGFR蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

13X分子篩(干燥劑用)  Molecular sieves Type 13X  質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用 Mousepyruvatekinase,PKELISA試劑盒小鼠同酸激酶(PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13X分子篩(3-5mm,球形)  Molecular sieves Type 13X  質(zhì)量規(guī)格：3-5mm,球形 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 ，英文名： P-PKC ELISA Kit

Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (Z)-Lachnophyllum lactone  中文名：  分子式：C10H10O2 

humanPepsinogenC,PG-CELISAKit人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (Z)-Butylidenephthalide  72917-31-8  中文名：  分子式：C12H12O2 

humanPepsinogenA,PG-AELISAKit人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  中文名：  分子式：C10H10O2 

HumanPepsin，PPELISAKit人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-4-Methoxydalbergione  2543-95-5  中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3 

HumanPeosidineELISAKit人戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2