產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

產(chǎn)品名稱	轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因核酸試劑盒說明書
英文名稱	詳見說明
貨號(hào)	BJ-R015062

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因核酸試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔神經(jīng)元烯醇化酶(rabbit NSE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Formyl-2-furylboronic acid  中文名：  分子式：C5H5BO4  度：98.0%

兔神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(rabbit -3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名：6,6'- 二芥子?；崽?span lang="EN-US">  分子式：C34H42O19  度：97.0%

兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rabbit NGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名：  分子式：C21H28O3 

兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）ELISA試劑盒     5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4 

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5-Amino-1-naphthol  中文名：5-氨基-1-萘酚  分子式：C10H9NO

避蚊胺(99%)  DEET  質(zhì)量規(guī)格：0.99 ELISAKitProtamine人魚精蛋白規(guī)格：48T/96T

特丁通(標(biāo)準(zhǔn)品)  Terbumeton  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit

噻呋酰胺(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)  Thifluzamide  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,96% 大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratbetacellulin,BTCELISAKit 96T/48T

(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tsumacide  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 Human LDL-IC ELISA Kit

特丁津(標(biāo)準(zhǔn)品)  Terbuthylazine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三特丁基膦(1.0 M in )  Tri-tert-butylphosphine  質(zhì)量規(guī)格：1.0 M in  FITC標(biāo)記二抗POD轉(zhuǎn)換試劑盒10

吡螨胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tebufenpyrad  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 MouseSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

萘乙酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  1-Naphthaleneacetamide  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒 ，英文名： sAIL ELISA Kit

噻蟲啉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thiacloprid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 96T/48T

三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% 人低密度脂蛋白(LDL)試劑盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit

HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl D-aspartate  79337-40-9  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  65855-02-9  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3 

Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISA試劑盒人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Benzylimidazole  中文名：1-芐基咪唑  分子式：C10H10N2 

HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名：  分子式：C9H15ClO3