注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	口蹄疫病毒A型/O型（FMDV-A/-O）核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
英文名稱	詳見說(shuō)明
貨號(hào)	BJ-R015095

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

口蹄疫病毒A型/O型（FMDV-A/-O）核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

兔固（ALD）ELISA試劑盒     5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  關(guān)鍵詞：  紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  關(guān)鍵詞：  千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2

內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸(>98.0%(T))  meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱RatAdiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格：96T/48T

吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[研究配體]  Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt  質(zhì)量規(guī)格：研究配體 肝脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[研究配體]  Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt  質(zhì)量規(guī)格：研究配體 ELISAKitFFA人游離脂肪酸規(guī)格：48T/96T

1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N))  1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetra  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N) 小鼠顆粒酶M(GZMM)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMM ELISA Kit

己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Adipate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 96T/48T

3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))  3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit

雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))  Bis(phenylacetyl) Disulfide  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

苯并紅紫4B[pH指示劑]  Benzopurpurine 4B  質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑 高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20

五甲氧基紅(>98.0%(HPLC))  Pentamethoxy Red  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) ELISAKitFEP人游離原卟啉規(guī)格：48T/96T

苯甲基橙(>95.0%(W))  Benzyl Orange  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(W) 小鼠顆粒酶K(GZMK)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMK ELISA Kit

Human neonatal thyroid stimulating hormone (N-TSH) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2 

Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒  22-Dehydroclerosteryl acetate  28594-00-5  中文名：  分子式：C31H48O2 

Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒  2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  中文名：2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3 

Human mannose lectin receptor (MBLR) ELISA Kit 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒  2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  中文名：2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式：C13H9Cl2NO 

Human mannose binding protein / mannose binding lectin (MBP/MBL) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒  2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde  中文名：  分子式：C7H5Br2NO