操作步驟：

1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷

2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）

3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）

5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存

產(chǎn)品名稱	生長(zhǎng)特性	貨號(hào)
C3H 10T1/2 2A6；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞	貼壁生長(zhǎng)	BJ-01X85225

細(xì)胞名稱 C3H 10T1/2 2A6；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性  1972年從C3H小鼠胚胎細(xì)胞中分離建立；在同系小鼠體內(nèi)不能成瘤，未發(fā)現(xiàn)自發(fā)轉(zhuǎn)化；化學(xué)制劑很容易引起該細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，建議只用5~15代的細(xì)胞。

培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS

傳代方法  2000cells/cm2傳代；2~3天換液1次。

傳代情況 不詳

凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

處理辦法：

① 脫落的細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)，若4小時(shí)后仍然沒有伸展，延長(zhǎng)靜置時(shí)間。注意，過夜靜置時(shí)，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

操作步驟

1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）

3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞

4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存

細(xì)胞凍存液操作示意圖：

H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) Rattus地奧司明Diosimin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地膚子皂苷Ic（標(biāo)準(zhǔn)品）Momordin Ic質(zhì)量規(guī)格：僅供鑒別用

4,4'-二甲氧基二苯酮(>99.0%(GC))  4,4'-Dimethoxybenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 小鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒 ，英文名： PRG4 ELISA Kit

2,2'-二羥基二苯甲酮(>99.0%(GC))  2,2'-Dihydroxybenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit 96T/48T

4,4'-二氨基二苯甲酮(>98.0%(T))  4,4'-Diaminobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 人白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒 Human Diphtheria aibody ELISA Kit

4,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))  4,4'-Dichlorobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 英文名稱MouseGlp-1ElisaKit小鼠胰高糖素肽(Glp-1)規(guī)格：96T/48T

3,3'-二氨基二苯甲酮(>95.0%(GC)(T))  3,3'-Diaminobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T) PRONASE酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50

3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))  3,3'-Dinitrobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))  2,4'-Difluorobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒 ，英文名： PKIγ ELISA Kit

4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))  4,4'-Difluorobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 人TH糖蛋白(THP)ELISA檢測(cè)試劑盒Huma-Hglycoprotein,THPELISAKit 96T/48T

1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))  1,4-Dibenzoylbenzene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 大鼠鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)試劑盒 Rat ornithine carbamoyl ansferase,OCT ELISA Kit人脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:PLA2G7, LDL-PLA2, LP-PLA2, PAFAD, PAFAH, Lipoprotein-associated phospholipase A2, phospholipase A2 group VII Human LpPLA2(Lipoprotein-associated Phospholipase A2) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組LpPLA2濃度

C3H 10T1/2 2A6；小鼠胚胎成纖維細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中