操作步驟：

1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷

2：離心收集對數(shù)生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）

5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

細胞名稱 LTK-；C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞（L929-TK-）

形態(tài)特性  成纖維細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性  該細胞派源自于 L-M(TK-)，表達5HT1Dβ受體。

培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS

傳代方法  1:4~1:8傳代；每周2次換液。

傳代情況

凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

處理辦法：

① 脫落的細胞進行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細胞和貼壁細胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時，若4小時后仍然沒有伸展，延長靜置時間。注意，過夜靜置時，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

操作步驟

1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

2：離心收集對數(shù)生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細胞

4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

細胞凍存液操作示意圖：

CLU Others Human  CLU / Clusterin 細胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(50g)Deuterium Chloride質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2O

成纖維細胞RNAHLF miRNA5 μg1酸-d3(100g )Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)質(zhì)量規(guī)格：D,99%

F13B Others Human  F13B / Coagulation factor XIII B chain 細胞裂解液 (陽性對照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.05%TMS

U251 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%

CL-0426RKO-E6(結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞)5×106cells/瓶×2氘代苯-D6(0.55ml x 10)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.03%TMS4-叔丁基杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))  4-tert-Butylcalix[4]arene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISA試劑盒人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-叔丁基杯[5]芳烴(>98.0%(HPLC))  4-tert-Butylcalix[5]arene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 植物源性食品土豆(potato)試劑盒20

杯[8]芳烴(>90.0%(HPLC))  Calix[8]arene  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC) Humahymicsomallymphopoietin,TSLPELISAKit人胸腺基質(zhì)細胞**素(TSLP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

杯[6]芳烴(>95.0%(HPLC))  Calix[6]arene  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 小鼠蛋白酶激活受體3(PAR3)ELISA試劑盒 ，英文名： PAR3 ELISA Kit

4-叔丁基杯[6]芳烴(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))  4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA檢測試劑盒Humanadiposediffereiation-relatedprotein,ADRPELISAKit 96T/48T

4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T))  4-Sulfocalix[4]arene Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(T) 大鼠尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒 Rat urease related protein C,UreC ELISA Kit

4-磺酰杯[6]芳烴水和物(>95.0%(HPLC))  4-Sulfocalix[6]arene Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 英文名稱RatAFPELISAKit大鼠甲胎蛋白(AFP)規(guī)格：96T/48T

4-磺酸杯[8]芳烴水合物(>98.0%(HPLC)(T))  4-Sulfocalix[8]arene Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 酵母化學(xué)感受態(tài)細胞制備試劑盒10

4-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙酸四乙酯(>96.0%(HPLC))  Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC) ELISAKitAST人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶規(guī)格：48T/96T

4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))  4-tert-Butylthiacalix[4]arene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 小鼠蛋白酶激活受體2(PAR2)ELISA試劑盒 ，英文名： PAR2 ELISA Kit人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:SFRP4, FRP-4, FRPHE, sFRP-4, secreted frizzled related protein 4, PYL, FRZB-2 Human SFRP4(secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組SFRP4濃度

LTK-；C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞（L929-TK-）細胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中