細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
M-1;小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化) |
貼壁生長 |
BJ-01X85235 |
細(xì)胞名稱 M-1;小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織,含SV40病毒的DNA序列,保留了皮質(zhì)集合管的某些特性,如形態(tài)和CCD(皮質(zhì)結(jié)合管)抗原。大多M-1細(xì)胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細(xì)胞或主細(xì)胞的特征;5%~10%的細(xì)胞有閏細(xì)胞和主細(xì)胞的雙重表型。當(dāng)該細(xì)胞在滲透性支持物上生長時,可形成具有負(fù)跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
M-1;小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物HOKL蛋白酶1底物2m,熒光Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic;
Ac-YVAD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
IGFBP6 Others
Human IGFBP6 / IBP-6 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶3底物1m,熒光Caspase 3 Substrate 1m(Apopain),
fluorogenic; Ac-DEVD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
BRL-3A 大鼠正常肝細(xì)胞肽B;天蠶絲肽Cecropin B質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0118HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2卡律蝎Charybdotoxin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞促皮質(zhì)素釋放因子,綿羊Corticotropin Releasing Factor,ovine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC)) 4,5-Difluorophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 96T/48T
4-己氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))
4-Hexyloxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 人白介素12(IL-12/P70)試劑盒 Human Ierleukin 12,IL-12/P70 ELISA KIT
4-羥基鄰苯二甲腈(>97.0%(GC))
4-Hydroxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱MouseInhibinAELISAKit小鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T
4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))
4-Nitrophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) pLKO.1-C+siRNA慢病毒(siRNA)
3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))
3-Nitrophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Rabbitacetylcholine,ACHELISA試劑盒兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰苯二甲腈(>99.0%(GC)) Phthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)ELISA試劑盒 ,英文名: LRP1 ELISA Kit
4-丙氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))
4-Propoxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA檢測試劑盒Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISAKit 96T/48T
4-戊氧基苯二甲腈(>98.0%(GC))
4-Pentyloxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠檸檬酸合酶(CS)試劑盒 Rat Ciate syhase,CS ELISA Kit
四氟鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)) Tetrafluorophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱RatPTHELISAKit大鼠甲狀旁腺(PTH)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
1,2-萘二甲腈(>98.0%(GC)) 1,2-Naphthalenedicarbonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母果膠甲酯酶(pectinmethylesterase;PME)活性比色法定量檢測試劑盒20人X組磷脂酶A2(PLA2G10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:GXPLA2, GXSPLA2, SPLA2 Human PLA2G10(Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PLA2G10濃度