細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性:
產品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
PUMC-mips-B1;小鼠誘導性多潛能干細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85279 |
細胞名稱 PUMC-mips-B1;小鼠誘導性多潛能干細胞
形態(tài)特性 克隆樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 裸鼠移植實驗證明可向三個胚層分化。
培養(yǎng)條件 KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer
傳代方法 1:10傳代;3~4天傳代一次
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務流程:
Hep 3B(肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27,,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質量規(guī)格:>95%,BR
AGRP Others
Human AgRP 細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27(6-27),,雞,小鼠,豬,大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse,
ovine,porcine, rat)質量規(guī)格:>95%,BR
角膜上皮細胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(16-38),,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse,
ovine,porcine, rat)質量規(guī)格:>95%,BR
SECTM1 Others
Human SECTM1 / K12 細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關肽(1-29),大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質量規(guī)格:>95%,BR
HMy2.CIR B 母細胞胰多肽,Pancreatic
Polypeptide,human質量規(guī)格:>95%,BR苯氧乙酸鈉(>98%,BR) Phenoxyaceti acid salt 質量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitGRP人胃泌素釋放多肽規(guī)格:48T/96T
水楊酸苯酯(>98%,BR) Phenyl salicylate 質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠泛醌細胞色素C還原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA試劑盒 ,英文名: UQCRC2 ELISA Kit
磷脂酶A2
Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom 質量規(guī)格:比活性:>200U/mg,BC 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA檢測試劑盒Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit
96T/48T
對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP) p-Hydroxybenzoic acid butyl ester salt 質量規(guī)格:>98%,USP 大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat
Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit
尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR) p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester salt 質量規(guī)格:>98.5%,BR 英文名稱RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒細胞胞漿抗體(甲固定)(pANCA)規(guī)格:96T/48T
尼泊金甲酯鈉(>99%,BR) p-Hydroxybenzoic acid methyl ester salt 質量規(guī)格:>99%,BR 寄生蟲總RNA分離試劑盒20
尼泊金丙酯鈉(>98.5%,USP) p-Hydroxybenzoic acid propyl ester salt 質量規(guī)格:>98.5%,USP ELISAKitGasin人胃泌素規(guī)格:48T/96T
庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠翻譯調節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)ELISA試劑盒 ,英文名: TPT1 ELISA Kit
聚維酮
Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex 質量規(guī)格:BR 人強啡肽(Dyn)ELISA檢測試劑盒Humandynorphin,DynELISAKit
96T/48T
聚 Polypropylene glycol 2000 質量規(guī)格:BR 大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CNTF Human CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CNTF濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞產品僅用于科研
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
PUMC-mips-B1;小鼠誘導性多潛能干細胞4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。