操作步驟：產(chǎn)品僅用于科研
1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷
2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來(lái)離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記
4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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D7C5E2；小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
半貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86184 |
細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠雜交瘤細(xì)胞；D7C5E2
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
處理辦法：
① 脫落的細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。
② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。
③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。
放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)，若4小時(shí)后仍然沒(méi)有伸展，延長(zhǎng)靜置時(shí)間。注意，過(guò)夜靜置時(shí)，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。
操作步驟
1：從冰箱拿出無(wú)血清非程序凍存液，待用
2：離心收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來(lái)離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
3：棄上清，加入適量無(wú)血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞
4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記
5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長(zhǎng)期保存
細(xì)胞凍存液操作示意圖：
5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名：5-芐基-1H-四唑 分子式：C8H8N4O 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)液 Alkaline phosphatase stain
Benzyl
4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名：4-羥基苯甲酸芐酯 分子式：C14H12O3 Acid phosphatase stain
(-)-Noe's
Reagent 108031-79-4 中文名：(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式：C24H38O3 尿蛋白定性測(cè)試盒 Acid esterase
stain
2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane 2024-88-6 中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 分子式：C17H14Cl2O4 嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸檢測(cè)試劑盒
48T
3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式：C12H18O2 綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span lang="EN-US">) 48TTES. Na;2-[(
TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸 TES 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit
3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉 TAPSO
mono 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
TAPSO；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸
TAPSO 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR MAPK蛋白共沉淀分析試劑盒5
N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉 TAPS Salt 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Porcinediamineoxidase,DAOELISA試劑盒豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1,1-環(huán)丙基乙二羧酸
1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA試劑盒 ，英文名： ALOX5 ELISA Kit
TAPS；N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸
TAPS 質(zhì)量規(guī)格：>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanOrexinB,OX-BELISAKit 96T/48T
PI3K 抑制劑 LY294002 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,進(jìn)分 大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit
羥乙基磺酸鈉
SHES 質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 英文名稱(chēng)RatMotilinELISAKit大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羥乙基醋酸鉀
PHES 質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 赫特法病毒DNA化試劑盒10/20補(bǔ)骨脂定 HPLC≥98% 20mg
5%ferricammoniumsulfate溶液500毫升
補(bǔ)骨脂二氫黃酮 HPLC≥98% 20mg 5%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液500毫升
補(bǔ)骨脂酚 HPLC≥98% 20mg 5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20
補(bǔ)骨脂寧 HPLC≥98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20
補(bǔ)骨脂素 HPLC≥98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20
菜油甾醇 HPLC≥98% 10mg
D7C5E2；小鼠雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇步驟：
1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?
2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋
4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化
5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6：1200rpm離心3分鐘
7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中