細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 大鼠骨髓瘤細(xì)胞；IR983F
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 用于建立大鼠雜交瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:6傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
IR983F；大鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
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生長(zhǎng)特性 |
懸浮生長(zhǎng) |
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貨號(hào) |
BJ-01X86232 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式：C29H52O3 度：96.5% 兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）ELISA試劑盒
7α-Hydroxysitosterol 中文名：7α-羥基谷甾醇 分子式：C29H50O2 度：95.0% 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
Ecdysterone
20,22-monoacetonide 中文名： 分子式：C30H48O7 度：98.0% 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol 中文名： 分子式：C28H46O3 度：97.5% 兔核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒
Qingyangshengenin 中文名：青陽參苷元 分子式：C28H36O8 度：97.5% 兔肌紅蛋白(rabbit
Myoglobin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝甘氨脫氧膽酸鈉(進(jìn)分) glycodeoxycholate 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分,Sigma G9910 英文名稱RatSHBGELISAKit大鼠性結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格：96T/48T
?；蛆Z去氧膽酸鈉
taurochenodeoxycholate 質(zhì)量規(guī)格：≥97.0%,BR 果菜乙比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甘氨脫氧膽酸(GDCA)
glycodeoxycholicacid 質(zhì)量規(guī)格：>97%,一水物 ELISAKitPF-4/CXCL4人血小板因子4規(guī)格：48T/96T
衣霉素
Tunicamycin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-10 ELISA Kit
甲東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Scopolamine methyl bromide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠凝血酶受體()ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthrombieceptor,ELISAKit
96T/48T
脫氧膽酸鈉；去氧膽酸鈉
deoxycholate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人層粘連蛋白β1(LN-β1)試劑盒 Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit
?；切苋パ跄懰?span lang="EN-US"> Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate
質(zhì)量規(guī)格：≥97% RatThrombopoietin,TPOELISAKit大鼠血小板**素(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
?；切苋パ跄懰徕c
Tauroursodeoxycholic Acid
Salt 質(zhì)量規(guī)格：≥97% Linsmaier&Skoog完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
新生霉素鈉鹽
Novobiocin 質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分 polyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISA試劑盒人多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
磺胺甲基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfamerazine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP1 ELISA Kit大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品） Hordenine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)ELISA試劑盒 ，英文名： HGFAC ELISA Kit
丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品) Danshensu 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒 ，英文名： c-MET/HGFR ELISA Kit
丹參素 Danshensu 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,丹參提取 小鼠肝再生擴(kuò)展生長(zhǎng)因子(GFER)ELISA試劑盒 ，英文名：
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
IR983F；大鼠骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。