細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
|
產(chǎn)品名稱 |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
|
WTRL1；大鼠肺細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86254 |
細(xì)胞名稱 大鼠肺細(xì)胞；WTRL1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性大白鼠的肺組織。1984年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Makisterone A
20,22-monoacetonide 中文名： 分子式：C31H50O7 度：% 兔素(Renin)ELISA試劑盒
Glaucogenin C
mono-D-thevetoside 中文名： 分子式：C28H40O9 度：98.0% 兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）ELISA試劑盒
17α-Estradiol 中文名：17α-雌二醇 分子式：C18H24O2 度：99.0% 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒
Stauntosaponin
A 中文名： 分子式：C28H38O7 度：97.0% 兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
Ergosta-7,22-dien-3-one 中文名：麥角甾-7,22-二烯-3-酮 分子式：C28H44O 度：95.0% 兔素(Renin)ELISAKit乳清酸
Orotic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),BR 大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T
氟尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Niflumic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(FGF6)試劑盒 Human FGF6 ELISA kit
木聚糖
XYLAN 質(zhì)量規(guī)格：>95%,來(lái)源于玉米芯,溶于水 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
阿特拉津,莠去津 Atrazine 質(zhì)量規(guī)格：>97% ISCOVE’SMDM培養(yǎng)基1/10升(片劑)
丁苯羥酸
Bufexamac 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR PlaGibberellicAcid,GAELISA試劑盒植物赤霉素(GA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-甘油酸激酶
3-Phosphoglyceric Phosphokinase 質(zhì)量規(guī)格：1000u/mg,Sigma分裝 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA試劑盒 ，英文名： SDF-1α/SDF1A ELISA Kit
1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖 d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP 質(zhì)量規(guī)格：90.0%,Sigma 大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit
96T/48T
酸性蛋白酶；蛋白酶來(lái)自佐氏曲霉
Acidic Protease from Aspergillus 質(zhì)量規(guī)格：BR,50u/mg 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)試劑盒 Human FGF4 ELISA kit
撲草凈
Prometryn 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蘿卜硫素；萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulforaphane 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 JM109電轉(zhuǎn)感受態(tài)5X100微升地達(dá)諾辛；去羥肌苷 Dideoxyinosine;Didanosine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 Rat
thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
羊藿苷I
Icariin I; Icariside I 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血栓素A2(TXA2)試劑盒 Rat
Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
寶藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Baohuoside II 質(zhì)量
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
WTRL1；大鼠肺細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。