細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 家兔腎細(xì)胞；RABK3
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性家兔的腎組織。2006年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
RABK3；家兔腎細(xì)胞 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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貨號(hào) |
BJ-01X86340 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Betaxolol 中文名：鹽酸倍他洛爾 分子式：C18H30ClNO3 度：98.0% 豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒
Ciprofloxacin 中文名：鹽酸環(huán)丙沙星 分子式：C17H19ClFN3O3 度：98.0% 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
Lincomycin 中文名：鹽酸林可霉素 分子式：C18H35ClN2O6S 度：98.0% 豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISAKit
Diphenhydramine 中文名：鹽酸苯海拉明 分子式：C17H22ClNO 度：98.0% 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit
中文名：鹽酸利多卡因 分子式：C14H23ClN2O 度：98.0% 豚鼠端粒酶(TE)ELISAKit羅哌卡因 Ropivacaine
base 質(zhì)量規(guī)格：>98%
Mouseansferrieceptor,TFRELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Ropivacaine base 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 試劑盒
醋酸棉酚
Gossypol-acetic acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.5%,BR Rat tarate resista acid phosphatase 5b
(ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒
過(guò)氧化氫酶(牛肝臟) Catalase 質(zhì)量規(guī)格：2,000-5,000 units/mg，進(jìn)分 HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
他唑巴坦,他唑巴坦酸 Tazobactam Acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISA試劑盒人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
他唑巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Tazobactam Acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 植物鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物 β-Nicotinamide
adenine dinucleotide hydrate(β-NAD) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物 β-Nicotinamide
adenine dinucleotide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠抗酸性0酸酶(ACP5)ELISA試劑盒 ，英文名： ACP5 ELISA Kit
β-NADP;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸;氧化型輔酶 II β-NADP 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人精氨酸加壓素(AVP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 96T/48T
鳥嘌呤鹽酸鹽
Guanine HCl 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠血紅蛋白(Hb)試劑盒 Rat Hemoglobin,Hb ELISA Kit高熊果酚苷 HPLC≥98% 10mg EB病毒介導(dǎo)永生化細(xì)胞克隆試劑盒10
HPLC≥98% 20mg
EDTA二血液抗凝液100毫升
告達(dá)亭苷元 HPLC≥98% 20mg
EDTA三血液抗凝液100毫升
戈米辛D HPLC≥98% 10mg
EDTA血液抗凝液100毫升
戈米辛G HPLC≥98% 20mg
EGFP標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
戈米辛J HPLC≥98% 20mg
EGFR蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
戈米辛N HPLC≥98% 20mg EGFR蛋白
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
RABK3；家兔腎細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。