細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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LDG-1；大耳山羊肺細(xì)胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X86368 |
細(xì)胞名稱 大耳山羊肺細(xì)胞；LDG-1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性大耳山羊的肺組織。1990年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Medetomidine 中文名：鹽酸美托咪啶 分子式：C13H17ClN2 度：98.0% 胃蛋白酶 1:3000 25g
Methyl
2,2-dithienylglycolate 中文名： 分子式：C11H10O3S2 度：98.0%
Pepsin1:3000,PorcineSource 100g
Tiotropium
bromide 中文名：噻托溴銨 分子式：C19H22NO4S2 度：98.0% 胃蛋白酶抑制劑 5mg
4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 中文名： 分子式：C14H18ClN3O4 度：98.0% Pepstatin
25mg
Lenalidomide 中文名：來那度胺 分子式：C13H13N3O3 度：98.0% 尾加壓素 II(Human Urotensin II) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝5-(2-氨乙基氨基)-1-萘磺酸鈉水合物(>98.0%(HPLC))
5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
Mousesolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
四熒光素鉀鹽(>85.0%(HPLC)) Tetrabromofluorescein Potassium Salt 質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(HPLC) 小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 ，英文名： B7-2/sCD86 ELISA Kit
溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))
2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 大鼠維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD3,VD3ELISAKit
96T/48T
3,4,5,6-四氯熒光素
3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格：熒光染料 人蛋白酪氨酸0酸酶1B(PTP1B)試劑盒 Human protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B ELISA Kit
赤蘚紅B(>95.0%(E)) Erythrosine B 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(E) RatPepsin,PPELISAKit大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
結(jié)晶紫九水合物(>95.0%(T)) Crystal Violet Nonahydrate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)
GMS10甲基化基因鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)10X100微升
2-氨基白啶氫化物(>98.0%(T))
2-Aminoperimidine Hydrobromide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) MouseSomatostatin,SSELISA試劑盒小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
CPC一水合物(=西吡氯銨一水合物)(>98.0%(HPLC)(T)) CPC Monohydrate (=Cetylpyridinium Chloride
Monohydrate) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒 ，英文名： sCD80/B7-1 ELISA Kit
百里酚酞氨羧絡(luò)合劑
Thymolphthalein Complexon 質(zhì)量規(guī)格：螯合劑 雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
鈣黃綠素藍(lán)(>98.0%(T)) Calcein Blue 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 人Ⅳ型前膠原氨基末端肽(PⅣNP)試劑盒 Human N-terminal procollagen Ⅳ propeptide,PⅣNP ELISA Kit和厚樸酚 Honokiol 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠骨鈣素(BGP)ELISA試劑盒 ，英文名： BGP ELISA Kit
素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ，英文名： OC ELISA Kit
紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Salidroside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素(OT)ELISA試劑盒 ，英文名： OT ELISA Kit
紅景天苷 Salidroside 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
LDG-1；大耳山羊肺細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。