細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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ST；豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86375 |
細(xì)胞名稱(chēng) 豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞；ST
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 ST細(xì)胞系建系于1960年（Mcclurkin,A W,et al）。ST細(xì)胞一般用于病毒增殖和分離，是豬細(xì)小病毒的理想宿主，可用于這類(lèi)病毒的分離及增殖。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C125
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide
1,1-dioxide 中文名： 分子式：C10H14N2O6S3 度：98.0% 纖溶酶原激活劑抑制因子1 英文名稱(chēng)： Human
Plasminogen Activator Inhibitor 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： PAI-1
3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 中文名： 分子式：C6H4Cl2OS 度：98.0% 纖溶酶原激活劑抑制因子2 英文名稱(chēng)： Human Plasminogen Activator Inhibitor 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)：
PAI2
4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide
1,1-dioxide 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3 度：98.0% 血小板活化因子受體 英文名稱(chēng)： Human
Platelet Activating Factor Receptor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： PAFR
Boc-3-Phenylisoserine 中文名： 分子式：C14H19NO5 度：98.0% 血小板衍生生長(zhǎng)因子c 英文名稱(chēng)： Human Platelet Derived Growth Factor C 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)：
PDGF-C
3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 中文名： 分子式：C22H25NO6 度：98.0% 蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span lang="EN-US">) 48T
二甲戊樂(lè)靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Pendimethaline 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T
氯菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Permethrin (isomers) solution 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)試劑盒 Human
LMP7/PSMB9 ELISA Kit
殘殺威標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Propoxur solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
草甘膦(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%) N-(Phosphonomethyl)glycine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
FLAG(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Phosphonomethyl)glycine solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) N-(Phosphonomethyl)glycine solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 ，英文名： sTM ELISA Kit
辛硫磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Phoxim 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T
除草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%) Nitrofen solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5% 人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)試劑盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit
2-萘氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)
2-Naphthoxyacetic acid 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide
solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% FLUORIDE血液抗凝液100毫升黃柏酮（標(biāo)準(zhǔn)品） Obacunone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP-6 ELISA Kit
黃豆黃苷（標(biāo)準(zhǔn)品）
Glycitin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨形成蛋白8B(BMP8B)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP8B ELISA Kit
黃豆黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）
Glycitein 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
黃獨(dú)素B
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
ST；豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。