細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
生長(zhǎng)特性 |
貨號(hào) |
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BIN-S1；瘤牛皮膚細(xì)胞 |
貼壁生長(zhǎng) |
BJ-01X86404 |
細(xì)胞名稱(chēng) 瘤牛皮膚細(xì)胞；BIN-S1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性瘤牛的皮膚組織。1995年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
5α-Androstanedione 中文名：5α-雄甾烷二酮 分子式：C19H28O2 度：98.0% 小鼠生長(zhǎng)因子(mouse
GH) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進(jìn)口分裝
1-Testosterone 中文名：1- 分子式：C19H28O2 度：98.0% 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse
GATA3) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進(jìn)口分裝
Canrenone 中文名：坎利酮 分子式：C22H28O3 度：98.0% 小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒 小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Prednisone
21-acetate 中文名：醋酸潑尼松 分子式：C23H28O6 度：98.0% 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa試劑盒 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒、小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
Clotrimazole 中文名：克霉唑 分子式：C22H17ClN2 度：98.0% 兔子上腺髓質(zhì)素elisa試劑盒 兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒、兔子上腺髓質(zhì)素elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。四螨嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Clofentezine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6% 大鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA檢測(cè)試劑盒ratadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 96T/48T
四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) Clofentezine solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4% 人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)試劑盒 Human
DAPK ELISA Kit
四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Clofentezine solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Carboxine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9% EBV(EPSTEIN-BARR)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2
環(huán)己醇(Standard for GC,>99.0%(GC)) Cyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.0%(GC)
MouseP-SelectinELISA試劑盒小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
敵草索(標(biāo)準(zhǔn)品) Dacthal 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒 ，英文名： PCK1 ELISA Kit
1-氯辛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)
1-Chlorooctane 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratin18,CK-18ELISAKit 96T/48T
十二烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Dodecane 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC) 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL
ELISA Kit
鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體: 5％HNO3) Bismuth solution 質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體: 5％HNO3 英文名稱(chēng)Ratt-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格：96T/48T
銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) Copper
solution 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 鈣ATP酶SERCA蛋白共沉淀分析試劑盒5甲基橙(IND) Methyl
orange 質(zhì)量規(guī)格：IND 酵母樣品二維電泳裂解液用于酵母蛋白二維電泳
甲基紅鈉鹽(IND)
Methyl Red salt 質(zhì)量規(guī)格：IND 酵母樣品二維電泳裂解液用于酵母蛋白二維電泳
甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %) Methyl Red
salt 質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 % 酵母乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
間甲基紅 m-Methyl red 質(zhì)量規(guī)格：指示劑 酵母乙醇脫氫酶總活性比色法定量
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
BIN-S1；瘤牛皮膚細(xì)胞4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。