儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
產(chǎn)品名稱 |
過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法 |
檢測方法 |
可見分光光度法、微板法 |
規(guī)格 |
48樣、96樣、196樣 |
貨號 |
BJS632 |
血清(漿)可直接測定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
試劑的組成:提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存; 試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 0.2mL×1 瓶,4℃保存;用時(shí)加入 3mL 試劑一充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存;
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?
1、細(xì)胞或組織樣品的制備:
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)細(xì)胞數(shù)量
(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體 多主枝孢(蠟葉芽枝霉)
AP2 beta 銜接蛋白β抗體 宛氏擬青霉
Gamma-Adaptin 銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體 匍枝根霉
AQP9 水通道蛋白-9抗體 聚多曲霉(薩氏曲霉)
Annexin A3 膜粘連蛋白A3抗體 鏈格孢
Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體 淡紫色擬青霉
APG8A 自噬相關(guān)蛋白8A抗體 光孢短柄帚霉
phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體 香蕉炭疽盤長孢菌
phospho-AMPK alpha-1 (Thr198) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 許旺酵母
phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體 清酒酵母
APOBEC3G 脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體 糖化酵母
AKAP13 蛋白激酶錨定蛋白13抗體 卡爾斯伯酵母
AP1M2 AP-1μ2抗體 滅酵母
Allergin-1 肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體 深紅酵母
ACCN1 腦鈉通道蛋白1抗體 粘紅酵母
ARP2/3 subunit 1B 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體 粉狀畢赤酵母
ABCG2 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體 土星漢遜酵母
氧化應(yīng)激系列 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒-NBT法 可見分光光度法 48樣
氧化應(yīng)激系列 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒-NBT法 微板法 96樣
氧化應(yīng)激系列 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒-NBT法 可見分光光度法 96樣
氧化應(yīng)激系列 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒-NBT法 微板法 196樣
氧化應(yīng)激系列 多酚氧化酶(PPO)試劑盒 可見分光光度法 48樣
氧化應(yīng)激系列 多酚氧化酶(PPO)試劑盒 微板法 96樣
氧化應(yīng)激系列 苯丙氨酸解氨酶(PAL)試劑盒 紫外分光光度法 48樣
氧化應(yīng)激系列 苯丙氨酸解氨酶(PAL)試劑盒 微板法 96樣
氧化應(yīng)激系列 脯氨酸(PRO)含量試劑盒 可見分光光度法 48樣
氧化應(yīng)激系列 脯氨酸(PRO)含量試劑盒 可見分光光度法 96樣
氧化應(yīng)激系列 脯氨酸(PRO)含量試劑盒 微板法 96樣
過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法氧化應(yīng)激系列 過氧化氫(H2O2)試劑盒 可見分光光度法 48樣
氧化應(yīng)激系列 過氧化氫(H2O2)試劑盒 微板法 96樣
氧化應(yīng)激系列 超氧陰離子(O?-)試劑盒 可見分光光度法 48樣
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。