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組織細(xì)胞培養(yǎng)分離技術(shù)

日期:2024-11-22 12:19
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摘要:組織細(xì)胞培養(yǎng)分離技術(shù)

組織細(xì)胞的分離:

1、離心分離法組織材料為血液、羊水、胸水、腹水,低速800-1000轉(zhuǎn)/分,5-10分鐘。

2、機(jī)械分離法

(1)剪切分散法,在進(jìn)行組織塊移植培養(yǎng)時(shí),使用該法

(2)機(jī)械分散法纖維成份很少的組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)采用的分離方法,如腦組織、部分胚胎組織以及一些腫瘤組織。

3、消化分離法

(1)胰蛋白酶法作用機(jī)理:作用于蛋白質(zhì)的肽鍵,使蛋白質(zhì)水解。適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織,還可適用于傳代細(xì)胞培養(yǎng)。作用因素:pH值、溫度、濃度、時(shí)間、組織塊類型。鈣、鎂、血清對(duì)其有抑制作用

(2)膠原酶法,對(duì)膠原的消化作用很強(qiáng),適用于纖維性組織、上皮及癌組織

(3)EDTA法,EDTA(乙二胺四乙酸)是一種非酶性消化物,作用機(jī)制:可從組織環(huán)境中吸取鈣、鎂離子,形成絡(luò)合物,利用結(jié)合后的機(jī)械力使細(xì)胞變圓而促進(jìn)細(xì)胞相互分離